牛血综合开发利用规模化生产工艺研究

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本文采用现代工业生物化学技术,对牛血进行了综合利用研究,从中提取了高价值的凝血酶,铜、锌—超氧化物歧化酶,从而使牛血变废为宝,并减少了因牛血废弃造成的环境污染。实验建立了可用于实现牛血铜锌超氧化物歧化酶和牛血凝血酶规模化生产的简便易行新工艺。新生产工艺采用管式分离机分离红细胞,建立了快速简便的红细胞连续分离技术,分离速度可达1600 kg牛血/h。提取SOD工艺中,通过实验研究确定铜锌盐存在下的一次热变性方法的工艺参数;在前人工作的基础上,建立红细胞连续分离和热变性、超滤、丙酮沉淀、离子交换等技术的SOD工艺。新工艺彻底革除传统除血红蛋白方法中的氯仿和乙醇且利用超滤技术浓缩提取液,减少了丙酮用量。结果表明,热变性反应温度控制在72℃-75℃时最适宜牛红细胞制备SOD;且在最适宜热变性温度下,随着所添加铜锌盐溶液浓度的增加,上清液的热变性效果明显提高;最终确定热变性最适宜条件为72℃和添加溶血液总体积3%的铜锌盐溶液。提取凝血酶工艺,对离子交换法提取纯化凝血酶的方法进行了改进:首先在-20℃对牛血浆进行冷冻处理,然后采用离子交换法提取纯化凝血酶。结果表明:血浆经-20℃冷冻处理后的凝血酶回收率为48.9%,是传统的离子交换法所得凝血酶回收率的1.4倍,比活力为1807.9U/mg,比传统的离子交换法所得凝血酶的比活力提高了1.2倍。
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