【摘 要】
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目的:探明PKCα蛋白的活性变化在糖尿病胃动力障碍中的机理;研究在糖尿病胃平滑肌中,C型利尿钠肽（CNP）通过蛋白激酶G（PKG）/蛋白激酶A（PKA）信号通路对四磷酸肌醇（IP4）和二酰基甘油（DG）含量的影响,以及了解其在糖尿病胃动力障碍疾病中的效用。方法:把50只体重180-220g、雌雄不限的SD大鼠,随机分为两组,对Diabetes组的25只大鼠进行腹腔注射链脲佐菌素来制造模型,另外一半
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（No.81560092）；
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目的:探明PKCα蛋白的活性变化在糖尿病胃动力障碍中的机理;研究在糖尿病胃平滑肌中,C型利尿钠肽（CNP）通过蛋白激酶G（PKG）/蛋白激酶A（PKA）信号通路对四磷酸肌醇（IP4）和二酰基甘油（DG）含量的影响,以及了解其在糖尿病胃动力障碍疾病中的效用。方法:把50只体重180-220g、雌雄不限的SD大鼠,随机分为两组,对Diabetes组的25只大鼠进行腹腔注射链脲佐菌素来制造模型,另外一半大鼠即为Control组,注射等量柠檬酸钠溶液;造模成功6w后,利用免疫组织化学技术和Western blot技术,来观察胃窦平滑肌组织中的PKCα、PKCβⅠ、PKCβⅡ的蛋白表达及其蛋白膜浆比在Control组及Diabetes组大鼠之间的差异,另外还检测了 PKCα磷酸化水平的改变;应用离体肌条实验技术检测大鼠胃窦平滑肌自主收缩的变化以检验CNP对其的影响;应用Elisa法测定了在Control组及Diabetes组大鼠胃窦平滑肌中IP4和DG含量,还检查了 CNP、KT5823和H-89这些药物对两组大鼠胃窦平滑肌中的IP4和DG含量的影响。结果:1.PKCα蛋白表达在Diabetes组大鼠胃窦平滑肌组织中明显比Control组更少（n=9,P<0.05）。2.PKCα膜浆比、PKCβⅠ膜浆比在Diabetes组大鼠胃窦平滑肌组织中均下调（n=9,P<0.05）。3.Diabetes组大鼠胃窦平滑肌组织中PKCα的磷酸化水平与Control组相比显著降低,PKCα活性下调（n=9,P<0.05）。4.CNP具有抑制Control组和Diabetes组大鼠胃窦平滑肌的自发性收缩运动的能力,收缩振幅、收缩频率、收缩完全时间、基础张力都会表现出下降状态,其抑制Diabetes组胃窦平滑肌收缩的能力远大于Control组（n=8,P<0.05）。5.IP4在Diabetes组大鼠胃窦平滑肌组织中的生成量与Control组比显著下调（n=8,P<0.05）,CNP对胃窦平滑肌组织产生IP4、DG的能力具有抑制作用,且在Diabetes组大鼠中表现得更明显（n=8,P<0.01）。6.在胃窦组织中同时用KT5823和H-89阻断PKG和PKA后,CNP减少IP4、DG含量的作用基本被抵消（n=8,P<0.01）。结论:1.在糖尿病大鼠胃平滑肌组织中PKCα蛋白表达和活性下调,抑制了平滑肌收缩;2.CNP通过PKG/PKA信号通路可使糖尿病大鼠胃平滑肌组织中IP4和DG产生的含量减少,从而抑制胃平滑肌收缩。这些变化可能在糖尿病胃轻瘫的发生机制中起重要作用。
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