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人参(Panax ginseng C. A. Meyer)是五加科(Araliaceae)人参属多年生草本植物,是举世闻名的古老药用植物之一。其主要的活性成分是人参皂苷(Ginsenoside),其均为三萜类皂苷,具有主补五脏、安精神、定魂魄、止惊悸、明目、开心益智,久服有轻身延年等多种药理功效。由于人参遗传研究较少,其基因组学的研究落后,严重制约了人参现代化遗传育种。番茄(Lycopersicon escaleutum. Mill)是茄科(Solanaceae)番茄属一年生或多年生草本植物。其主要活性物质是番茄红素(lycopene),具有预防血管老化,预防癌症、抗老化等多种药用功效。利用本实验已构建好的人参基因组的BIBAC文库,选择番茄品种粉冠888作为受体材料,通过农杆菌介导的叶盘法对番茄进行遗传转化,以期获得转化植株,为人参基因组功能的鉴定和番茄种质资源创新提供技术支持。本研究的结果如下:1.含大片段DNA(D8)农杆菌COR308的对数生长期为10-13小时,选用11-12小时的农杆菌进行转化实验。含大片段DNA(D21)农杆菌COR308的对数生长期为10-14小时,选用12-13小时的农杆菌进行实验。2.诱导培养基:MS固体培养基(1%蔗糖);预培养培养基:MS固体培养基(3%蔗糖)+IAA0.2mg/L+6-BA1~2mg/L;共培养培养基:MS固体培养基(3%蔗糖)+IAA0.2mg/L+6-BA1~2mg/L+AS0.2mg/L;生根培养基:MS固体培养基(3%蔗糖)+NAA0.1mg/L+Cef100mg/L。3.转化条件确定OD550=3.0时的农杆菌重悬液,重悬液成分为MS(3%蔗糖)+IAA0.2mg/L+6-BA1~2mg/L,预培养时间为2d,侵染时间为8min,共培养天数为4d。4.经筛选得到抗性芽1514个,生根移栽后得到抗性植株53株。经PCR检测,共有12株植株呈阳性,其中D8转化得到7棵阳性植株,转化率为0.2%;D21转化得到5株阳性植株,转化率为0.254%,初步判断人参大片段DNA转入番茄。5.通过对番茄转化植株和未转化植株生长的观察,发现D8的转化植株在叶片颜色改变、叶脉呈紫色,茎杆较为光滑且绒毛明显减少,果实种子变多且小;D21的转化植株在叶片及叶脉颜色全部呈紫色,花瓣及萼片的数量发生变化。