血浆miR-424、miR-92a及miR-130b在食管鳞癌中的表达及临床意义

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目的:通过检测食管鳞癌(Esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)患者和健康人群血浆中miR-424、miR-92a及miR-130b的表达水平差异,探讨其与食管鳞癌临床病理学特征之间的关系,评估其在食管鳞癌中的诊断价值。方法:1.血浆miR-424、miR-92a及miR-130b在食管鳞癌患者和健康人群的表达水平收集成都医学院第一附属医院胸心外科2017年1月至2018年5月食管鳞癌患者血浆标本70例及同期健康体检者血浆标本60例,分离、提取血浆总RNA,进行纯度测定、分析,将合格标本予以逆转录,合成cDNA,查询获取并合成目的微小RNA(MicroRNA,miRNA)引物序列,利用实时定量聚合酶链式反应(Quantitative Real-Time Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR)检测食管鳞癌患者和健康体检者血浆中miR-424、miR-92a及miR-130b表达水平差异,2-ΔΔCt为目的基因的相对表达量,2-ΔCt为食管鳞癌或健康体检者的表达量(ΔCt食管鳞癌=Ct食管鳞癌-Ct内参,ΔCt健康人群=Ct健康人群-Ct内参,ΔΔCt=ΔCt食管鳞癌-ΔCt健康人群)。2.血浆miR-424、miR-92a及miR-130b与食管鳞癌临床病理学特征的关系利用qRT-PCR检测不同时期食管鳞癌患者血浆中miR-424、miR-92a及iR-130b表达水平,探讨与食管鳞癌临床病理学特征的关系。3.血浆miR-424、miR-92a及miR-130b在食管鳞癌中的诊断价值运用受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic curve,ROC)计算血浆miR-424、miR-92a及miR-130b用于诊断食管鳞癌的特异度、敏感度及曲线下面积(Area under the ROC curve,AUC),评估上述三种血浆miRNA在食管鳞癌中的诊断价值。结果:1.食管鳞癌患者血浆中miR-424、miR-92a及miR-130b表达水平相对于健康人群均明显上调,差异均具有统计学意义(P<0.001)。2.血浆miR-424表达水平与食管鳞癌肿瘤有无淋巴结转移及肿瘤分期均无统计学差异(P>0.05)。血浆miR-92a表达水平在有淋巴结转移的食管鳞癌患者中均比无淋巴结转移患者明显增高(P=0.001);并且TNMⅢ期的食管鳞癌患者的血浆miR-92a表达水平明显高于TNMⅠ和Ⅱ期的患者(P=0.001;P=0.007)。伴有淋巴结转移的食管鳞癌患者血浆miR-130b表达水平比无淋巴结转移患者明显增高(P=0.025);与此同时,TNMⅢ期食管鳞癌患者血浆miR-130b表达水平较Ⅰ、Ⅱ期明显上调(P<0.001)。食管鳞癌患者年龄、性别、肿瘤位置间的血浆miR-424、miR-92a及miR-130b的表达水平均无统计学意义(P>0.05)。3.血浆miR-424、miR-92a及miR-130b用于诊断食管鳞癌所对应的AUC分别为0.759(95%CI:0.674 to 0.844),0.749(95%CI:0.668 to 0.836)和0.833(95%CI:0.759 to 0.906);特异度及敏感度分别为83.33%和62.86%,71.67%和74.29%,86.67%和77.14%。4.miR-424和miR-92a、miR-424和miR-130b、miR-92a和miR-130b联合用于食管鳞癌诊断的AUC分别为0.813(95%CI:0.735-0.876)、0.853(95%CI:0.780-0.909)和0.849(95%CI:0.775-0.906),特异度和敏感度分别为83.33%和68.57%、76.67%和85.71%、78.33%和82.86%。miR-424、miR-92a及miR-130b三者联合诊断食管鳞癌AUC为0.873(95%CI:0.804-0.925),敏感度和特异度分别为87.14%和76.67%。结论:1.食管鳞癌患者血浆miR-424、miR-92a及miR-130b表达水平均明显高于健康人群;2.血浆miR-92a、miR-130b表达水平均随着食管鳞癌患者的淋巴结转移和TNM分期的增高而增高,提示这两种miRNA可能在食管鳞癌中发挥重要作用;3.较单个miRNA而言,血浆miRNA联合更能提高食管鳞癌的诊断价值,miR-424、miR-92a及miR-130b三者联合更适合作为食管鳞癌诊断的生物学标志物。
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