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目的与方法：甲状腺乳头状癌(Papillary thyroid carcinoma,PTC)和滤泡癌(thyroid follicular carcinoma.FTC)是甲状腺滤泡源性肿瘤的常见类型,根据有否淋巴结转移和分化程度不同,PTC分为有转移组和无转移组,FTC分为高分化型和低分化型,国内外有文献报道CK19、Vimentin、VEGF、VEGF-C、COX-2与PTC和FTC的诊断、鉴别诊断、转移、分化有关。本文第一部分采用免疫组织化学方法对两种甲状腺癌中CK19、Vimentin、VEGF、VEGF-C、COX-2的表达进行检测,通过分析五种指标在这两种疾病中的表达,探讨这五种指标的表达与PTC和FTC的诊断、鉴别诊断、转移、分化之间的关系。CK19、Vimentin、VEGF、COX-2、VEGF-C在PTC、FTC阳性率的比较采用两独立样本率比较的x2检验,两组等级资料的相关性采用双变量相关分析(Bivariate)等级相关系数(Spearman相关系数)非参数检验,等级资料采用秩和检验,PTC和FTC年龄比较采用两独立样本的t检验。本文第二部分应用分子生物学方法对雌激素受体(Estrogen receptor;ER)和孕激素受体(Progesterone receptor,PR)基因在甲状腺乳头状癌、结节性甲状腺肿、桥本性甲状腺炎的表达情况进行研究,从而对雌激素受体和孕激素受体与甲状腺疾病的相关性进行分析,为临床的诊断、治疗和预后提供理论依据。ER, PR的结果采用完全随机设计下定量资料的方差分析。采用RT-PCR和SYBR Green QRT-PCR两种方法对ER, PR两种基因进行定性、定量的检测。结果：1.PTC、FTC性别(女／男)比分别为3.27／1、3.15／1,PTC的性别比与FTC性别比经x2检验差异无统计学意义,x2=0.009 (P>0.05); PTC、FTC平均确诊年龄分别为41.86,41.65(岁),经t检验差异无统计学意义(t=0.085,P>0.05),PTC男性平均确诊年龄(47.68岁)大于女性平均确诊年龄(40.08岁),t=2.313,P<0.05。FTC高分化型平均确诊年龄(37.22岁)低于低分化型(46.07岁),t=-2.043,差别有统计学意义(P<0.05)。2.CK19主要表达于癌细胞的胞浆。乳头状癌中转移灶CK19的阳性率(91.43%)高于原发灶(89.83%),滤泡癌中高分化型CK19的阳性率(74.07%)高于低分化型(48.15%),差别无统计学意义(P>0.05)。乳头状癌CK19总的阳性率(90.43%)高于滤泡癌(61.11%),差别有统计学意义(P<0.05)。3.Vimentin阳性物质主要分布于胞浆,癌细胞和间质细胞呈阳性着色。选取的PTC、FTC病例中Vimentin的阳性表达率都是100%,强阳性率分别为50.00%、16.67%,PTC组的强阳性表达率高于FTC组的强阳性表达率,PTC转移灶Vimentin的阳性表达强度高于原发灶,FTC高分化型Vimentin的阳性表达强度高于低分化型,经秩和检验差别有统计学意义(P<0.05)。4.VEGF-C主要表达于癌细胞的胞浆,乳头状癌中转移灶VEGF-C的阳性率(88.57%)高于原发灶(84.75%),滤泡癌中高分化型VEGF-C的阳性率(88.89%)高于低分化型(85.19%),PTC、FTC.总的VEGF-C阳性表达率分别是86.17%、87.04%,PTC组低于FTC组,差异都无统计学意义(P>0.05)。在表达强度上,VEGF-C在PTC的强阳性表达率(24.69%)高于FTC(8.51%)(P<0.05)。5.COX-2表达于癌细胞的胞浆。乳头状癌中转移灶COX-2的阳性表达率(82.86%)高于原发灶(81.36%),滤泡癌中高分化型(85.19%)高于低分化型(77.78%),选取的PTC、FTC,总的COX-2阳性表达率分别是81.91%、91.48%,PTC组高于FTC组的阳性表达率,三组差别均无统计学意义(P>0.05)。6.VEGF表达于癌细胞的胞浆,PTC中转移灶VEGF的阳性率(92.50%)高于原发灶(90.00%),FTC中低分化型组(92.86%)高于高分化型组(87.10%),PTC组(91.25%)高于FTC组的阳性表达率(89.83%),三组差别无统计学意义(P>0.05)。7.90.43%的乳头状癌CKl 9和Vimentin的表达结果一致(同时阳性或同时阴性),经过Spearman等级相关分析,相关系数r=0.188(P>0.05)。滤泡癌中仅有61.11%的病例CK19和Vimentin的表达结果一致,经过Spearman等级相关分析,相关系数r=0.228(P>0.05)。乳头状癌中有95.74%的病例VEGF-C与COX-2表达结果一致(同时阳性或同时阴性),经过Spearman等级相关分析,两者在乳头状癌的表达呈正相关关系,相关系数r=0.438(P<0.05)。在PTC原发灶、转移灶,FTC高分化型组、低分化型组VEGF-C和COX-2的免疫强度均显示弱阳性>中度阳性>强阳性,但VEGF-C中PTC原发灶和COX-2中FTC转移灶表现为中度阳性>弱阳性>强阳性。8.四种指标中灵敏度最高的是Vimentin (100.00%)。9.RT-PCR结果显示结节性甲状腺肿5例中有4例在100～250 bp之间ER有阳性目的条带,阳性率是80%,PR均未见阳性条带。10.RT-PCR结果显示PTC 7例标本中有1例在100～250 bp之间ER有阳性目的条带,阳性率是14%,PR均未见阳性条带。11.RT-PCR结果显示HT 2例标本在100～250 bp之间中均可见ER阳性目的条带,均未见PR阳性条带。12.实时定量PCR的结果显示,PTC与结节性甲状腺肿ER表达之间差别无统计学意义,桥本性甲状腺炎与结节性甲状腺肿比较差别无统计学意义。结论：1.本实验观察PTC和FTC平均确诊年龄(41.86岁,41.65岁)差异无统计学意义,PTC男性平均确诊年龄(47.68岁)大于女性平均确诊年龄(40.08岁),FTC高分化型平均确诊年龄(37.22岁)低于低分化型(46.07岁),差别有统计学意义(P<0.05)。2.乳头状癌CK19总的阳性率(90.43%)高于滤泡癌(61.11%),有统计学意义(P<0.05)。提示CK19可以作为鉴别PTC和FTC的指标。PTC组的强阳性表达率(51.76%)高于FTC组的强阳性表达率(27.27%),PTC转移灶Vimentin的阳性表达强度高于原发灶,FTC高分化型Vimentin的阳性表达强度高于低分化型,有统计学意义(P<0.05)。提示Vimentin可以作为鉴别PTC和FTC的指标,并且与甲状腺癌的转移、分化有关系。VEGF-C在PTC组的表达强度高于FTC组的表达强度,VEGF-C在PTC的强阳性表达率高于FTC(P<0.05),可以在表达强度方面为PTC和FTC的鉴别提供依据。3.CK19、Vimentin在PTC、FTC的表达无相关性。VEGF-C、COX-2与滤泡癌的分化程度呈正比,并且两指标之间呈正相关趋势,乳头状癌的转移与VEGF-C、COX-2的表达呈正相关趋势,并且两指标之间呈正相关趋势。VEGF-C与COX-2经过Spearman等级相关分析,两者在乳头状癌的表达呈正相关关系,相关系数r=0.438,P<0.05。在PTC原发灶、转移灶,FTC高分化型组、低分化型组VEGF-C和COX-2的免疫强度均显示弱阳性>中度阳性>强阳性,但VEGF-C中PTC原发灶和COX-2中FTC转移灶表现为中度阳性>弱阳性>强阳性。上述结果提示相似的癌组织分化程度越高和出现转移灶不仅表现在VEGF-C和COX-2表达阳性率的升高,还可以表现在免疫表达的阳性强度方面的一致性。提示VEGF-C和COX-2在两种癌的发生、发展、浸润转移中起到协同和相互促进的作用。4.综合检测CK19、Vimentin、VEGF、VEGF-C和COX-2的表达对甲状腺滤泡源性恶性肿瘤的诊断、鉴别诊断、分化程度、肿瘤转移趋势和预后评估具有一定的参考价值。5.甲状腺良恶性疾病中均可检测出ER基因的表达,其中桥本性甲状腺炎的ER基因表达量最高,乳头状癌次之,结节性甲状腺肿最低,说明雌激素在甲状腺疾病的发生和发展中起一定的作用,但是实时定量结果显示三种疾病之间差异无统计学意义,提示雌激素对甲状腺疾病所起的作用可能是间接的。甲状腺乳头状癌被认为是激素依赖性肿瘤,ER的检测为甲状腺疾病的诊断和甲状腺疾病的激素治疗提供了依据。