茄科作物青枯菌LysR家族转录调控因子的功能研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shuzhong12miyan
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LysR转录调控因子是能够进行自我调节的一类调控因子,广泛存在于微生物群体,参与新陈代谢、群体感应、细菌毒性、游动性等多种生命活动过程。Ralstoniasolanacearum是引起茄科作物青枯病的病原物,利用生物膜、游动性等致病因子在寄主植物上形成为害。R.solanacearum含有大量的LysR类型的转录调控因子,但功能还没有得到详细阐述。本研究以R.solanacearum模式菌株GMI1000为对象,对已经注释的79个LysR转录调控因子进行定点插入突变,分析在营养代谢、游动性、生物膜及致病力方面的调控作用,发现lysR37(RS16695)对细菌的生长繁殖、在非寄主植物上的过敏反应、糖代谢能力没有影响,但负调控游动性和致病力。为进一步确定lysR37的功能,利用自杀质粒构建了缺失突变体。Real-time PCR和启动子-GusA融合实验结果显示,调控鞭毛合成的基因flhD在突变体中表达水平上升。酵母单杂交及凝胶阻滞实验表明,LysR37可以直接结合到flhD基因的启动子序列上。同时,Real-time PCR的结果显示,LysR37负调控hrpG和hrpB的表达水平。本论文利用定点插入方法系统突变茄科作物青枯菌R.solanacearum中的LysR转录调控因子,分析了与致病相关的表型;确定了转录调控因子LysR37对鞭毛合成调控基因flhD的负调控作用,从而影响了致病力。青枯菌LysR转录调控因子的研究为深入了解青枯菌的侵染机制提供了理论依据。
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