三氧化二砷对腺样囊性癌ACC-2细胞p53基因表达的影响

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目的研究三氧化二砷(arsenic trioxide, As203)对腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma, ACC)细胞株ACC-2细胞p53基因表达的影响,探讨其诱导腺样囊性癌细胞凋亡可能的分子机制。方法体外培养腺样囊性癌ACC-2细胞,给予指数生长期的细胞不同浓度(1.0、2.0、4.0、8.0μmol/L)的As2O3溶液和RPMI-1640培养液作为实验组和对照组。给药后继续培养24h、48h,观察不同浓度As2O3对腺样囊性癌ACC-2细胞的生长抑制作用,应用免疫组化和RT-PCR检测p53蛋白和基因的表达变化。结果1.As2O3对腺样囊性癌ACC-2细胞生长的抑制作用与时间、剂量相关。As2O3处理24h后ACC-2细胞形态无明显变化,处理48h后ACC-2细胞缩小变圆、细胞间隙增大、细胞核分裂相减少,且抑制作用随浓度的增加而增大。2.腺样囊腺癌ACC-2细胞p53蛋白在各组中均呈阳性表达,不同浓度As2O3处理p53蛋白表达量差异有显著统计学意义(P<0.01),不同处理时间p53蛋白表达量差异有统计学意义(P<0.05),除1μmol/L与2μmol/L As2O3处理组比较无明显差别(P>0.05)外,其余不同浓度组两两比较均有统计学意义(P<0.05)。3.腺样囊性癌ACC-2细胞p53mRNA第123位点存在C→A的点突变,不同浓度、处理时间测序结果相同。不同浓度、处理时间p53mRNA表达量差异有显著统计学意义(P<0.01),不同浓度组两两比较均有统计学意义(P<0.05)。结论三氧化二砷能够下调腺样囊性癌ACC-2细胞中突变型p53mRNA及蛋白的表达,可能是三氧化二砷诱导腺样囊性癌ACC-2细胞凋亡的机制。
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