脂肪细胞是脂肪组织中最主要的细胞类型,其分化与代谢过程受到精细的调控。猪脂肪沉积的量与分布部位是影响肉品质的重要因素,其中,肌内(IM)脂肪是指嵌入猪骨骼肌组织内的脂肪细胞,决定了肉的风味、嫩度和多汁性,是衡量肉品质的重要指标。皮下(SC)脂肪主要积聚在猪的背部和腹部,影响猪胴体性状,与瘦肉率呈负相关。然而,猪肌内与皮下脂肪的沉积具有高度的协同性,即高肌内脂肪含量的猪种往往也沉积较多的皮下脂肪。因此,鉴定两种脂肪细胞代谢调控差异,有助于实现分别调控猪肌内与皮下脂肪沉积的育种策略。越来越多的研究证实,microRNAs(miRNAs)在动物脂类代谢中发挥重要作用,但其调控猪肌内与皮下脂肪沉积的差异,尚不清楚。本研究以成脂诱导分化至第10天的猪肌内和皮下前体脂肪细胞为材料,采用RNA-Seq测序技术对这两种脂肪细胞miRNAs转录组进行表达谱分析。结果显示,IM和SC脂肪细胞共检测到155个差异表达(SDE)miRNAs与Sus scrofa miRNAs完全匹配。GO和KEGG分析显示,SDE-miRNAs的靶基因主要集中在转录调控、脂肪酸生物合成以及MAPK和PI3K-Akt等通路上。利用real-time PCR分析发现,miR-206在两种脂肪细胞中的差异表达倍数最高,达到36倍,且随着脂肪细胞的分化,miR-206的表达丰度逐渐下降。此外,过表达miR-206能够抑制IM和SC脂肪细胞的增殖和胞内甘油三酯的积累,降低细胞增殖标志基因及脂合成标志基因的表达丰度。进一步通过荧光素酶活性测定,real-time PCR和western blot分析证实,miR-206通过直接靶向STARD7抑制脂肪细胞增殖,也可通过靶基因KLF4抑制脂肪生成。这些结果为了解我国家猪品种脂肪细胞代谢网络提供了理论依据。有助于实现不减少肌内脂肪含量的前提下,降低皮下脂肪积累的育种目标,对于改良我国脂肪型地方猪种意义重大。因此,发现调控猪脂肪细胞代谢的关键miRNAs,有助于增加对两种脂肪细胞代谢调控网络的认识,为优质瘦肉猪的培育提供理论依据。