番茄褪绿病毒（Tomato chlorosis virus,ToCV）为长线形病毒科（Closteroviridae）毛形病毒属（Crinivirus）病毒,自2013年在我国山东爆发,现呈全国扩散趋势,严重威胁我国番茄等茄科重要经济作物的安全生产。加强该病毒的快速检测技术体系,病毒与寄主互作的分子机制等研究,可明确该病毒在我国的扩散分布,分析其对番茄等重要经济作物的潜在威胁,也可为该病毒病的科学防控提供技术手段和科学依据。利用原核表达的ToCV CP及HSP70蛋白作为抗原,制备获得CP蛋白和HSP70蛋白的多克隆抗体,稀释10,000倍,可特异性识别相应的抗原,为开发ToCV快速检测技术提供了技术资源。采用无缝克隆技术,构建了ToCV全长基因组cDNA侵染性克隆,利用农杆菌接种本氏烟BY2细胞和番茄,均接种不成功;农杆菌介导法接种本氏烟,接种成功率为15%。采用基因枪法,ToCV侵染性克隆质粒接种本氏烟和番茄,也均接种失败;利用PEG介导法接种本氏烟BY2细胞,ToCV侵染率可达60%。利用粉虱接种ToCV至番茄,采用相对定量技术测定接种病毒后番茄各部位的感病时间及病毒含量,结果表明10 dpi可在接种叶上检测到病毒,15 dpi接种叶以上的部位均可检测到病毒,接种20 dpi接种叶下部的叶片检测到病毒,且下部叶的含量最低,接种初期接种叶中病毒含量最低,随着病情发展,心叶的病毒含量最高。通过MDC染色、LC3蛋白含量,测定了ToCV感染番茄,对番茄自噬体途径的影响,结果表明,ToCV感染番茄,能够激活番茄的细胞自噬体途径。3-MA抑制番茄自噬体小泡的延伸,3-MA处理番茄叶片,可以促进番茄细胞自噬体途径ATG1上调表达,且促进ToCV的复制。而BFA促进ER和高尔基体解体,抑制自噬体途径启始;BFA处理番茄叶片,ATG1表达量和ToCV复制量均无差异。酵母双杂交结果表明,ToCV CP及CPm蛋白,均可与番茄自噬体途径ATG1蛋白发生互作。番茄ATG1蛋白参与自噬起始;因此,根据以上结果,推测ToCV激活番茄自噬体小泡形成启始阶段,促进不成熟自噬体小泡形成,以不成熟自噬体小泡双层膜作为复制位点,促进病毒复制。ToCV与番茄自噬体途径互作的详实分子机制,还需CO-IP和BiFC验证二者互作真实性,ATG1蛋白表达对ToCV复制的影响。