克伦特罗,瘦肉精的主要成分,常被非法添加到动物饲料中,以提高猪肉瘦肉率。常规的检测方法成本高、耗时长。因此,如何快速、准确、实时检测克伦特罗及其代谢物是国内外研究的热点。根据相关文献报道,确定克伦特罗在猪尿液中的主要代谢物,选择了主要代谢物中3,5-二氯-对氨基扁桃酸、原药克伦特罗(CLB)和3,5-二氯-对氨基马尿酸为研究对象。分别选择4-羟基扁桃酸(HMA)去氧肾上腺素(PE)、和对氨基马尿酸(AHA)为3,5-二氯-对氨基扁桃酸克伦特罗、及3,5-二氯-对氨基马尿酸替代模板分子。第一部分,利用高效液相色谱法将CLB、HMA和AHA三种物质进行分离,确定最佳分离条件:Inertsil ODS-3 C18色谱柱(4.6 mm ID×250mm,5?m),流动相为A液(0.05%三氟乙酸水溶液):B液(0.05%三氟乙酸乙腈溶液)=73:27。同时,绘制了CLB、AHA和HMA的浓度与信号峰面积的标准曲线,三种物质的标准曲线线性关系良好,其中CLB标准曲线为y=17315.6734 x+112602.8427,R~2=0.9995;AHA的标准曲线为y=13744.7429 x-89583.6575,R~2=0.9998;HMA的标准曲线y=6386.5714 x-1762.0928,R~2=0.9992。第二部分,研究了接枝在硅胶表面的替代模板分子印迹聚合膜的选择吸附性能。首先制备了APCA-硅胶,并在其表面合成替代模板分子印迹膜,并探讨优化了在硅胶表面合成PE-MIPs、AHA-MIPs和HMA-MIPs印迹膜的最佳反应条件:温度65℃,时间12h。最佳反应条件下制备的PE-MIPs对CLB吸附率为92.34%,AHA-MIPs对AHA的吸附率为88.68%,HMA-MIPs对HMA的吸附率为91.84%。同时,纯硅胶对CLB、AHA和HMA的吸附率分别为18.36%、33.65%和22.41%;最佳反应条件下未加替代模板分子的聚合膜对CLB、AHA和HMA的吸附率56.99%、51.19%和51.21%。最后一部分,研究了接枝在石英晶体微天平表面替代模板分子印迹聚合膜的形态。在石英晶体微天平上接枝制备出ABAH-QCM,显微红外表征分析结果表明接枝成功。在ABAH-QCM合成了克伦特罗替代模板分子印迹聚合膜,圆二色谱分析表明替代模板分子印迹聚合膜具有类似于蛋白质二级结构,生物快速扫描探针显微镜观察替代模板分子印迹聚合膜为空穴的三维网状结构形态。本研究可为后续开发基于分子印迹膜结合石英晶体微天平阵列技术的快速、实时、便捷检测猪尿液克伦特罗及其代谢物的电子舌提供技术支持和理论依据。同时,由于分子印迹技术普通适用性,也为食品安全领域如毒物的富集、检测等提供参考。