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目的:应用PCR法和ELISA法分别检测呼吸道感染患者PBMC和RBC中的Cpn DNA及血清中Cpn-IgG,以了解本地区Cpn的感染率;并结合呼吸道感染患者病史及其他临床资料,分析在呼吸道疾病中Cpn感染的重要性,为监测该病原体的流行及进一步研究其预防措施提供一定的参考。方法:收集173名呼吸道感染患者和52名健康体检者外周血标本,分离PBMC、血清和红细胞。用基因组DNA提取试剂盒提取纯化PBMC和RBC中的DNA,以该DNA为模板,用特异性引物体外PCR扩增Cpn 16S rRNA和MOMP基因。扩增产物按照标准方法在1.5%琼脂糖凝胶中电泳鉴定,并对产物DNA进行测序,并与Genebank中登录的Cpn AR-39序列进行BLAST比较,以进一步确认扩增产物为Cpn特异性基因。用ELISA诊断试剂盒(Savyon Diagnostics)检测待测血清中的Cpn-IgG抗体。通过PCR与ELISA的检测结果,结合临床资料进行综合分析。结果:以PBMC DNA提取物为模板,呼吸道感染组中Cpn MOMP阳性率为32.40%(56/173),16S rRNA阳性率为33.52%(58/173);在对照组52人中,5人MOMP和16S rRNA扩增阳性,阳性率为9.62%;经测序比对:MOMP扩增产物与Cpn AR-39的MOMP基因99%一致;16S rRNA扩增产物与AR-39的16S rRNA基因97%一致。在所有的RBC DNA样本中均未检出Cpn基因。ELISA检测血清Cpn-IgG,感染组阳性率50.87%(88/173),对照组阳性率为30.77%(16/52)。血清Cpn-IgG抗体检测及16S rRNA和MOMP PCR扩增结果均显示呼吸道感染组Cpn感染阳性指标均显著高于健康对照组。ELISA、16S rRNA PCR及MOMP PCR三种方法检测Cpn感染指标在各年龄组的阳性率分别为:18～40岁年龄组40.00%(14/35)、22.86%(8/35)和17.14%(6/35);41～60岁年龄组27.78%(10/36)、13.89%(5/36)和13.89%(5/36);61～79岁年龄组60.24%(50/83)、48.19%(40/83)和48.19%(40/83);80岁以上年龄组73.68%(14/19)、26.32%(5/19)和26.32%(5/19)。根据各组的阳性率可以看出,老年人的Cpn感染率最高。3例PCR阳性的呼吸道感染患者Cpn-IgG检测为阴性;同样35例Cpn-IgG阳性的患者,35例16S rRNA PCR阴性,33例MOMP阴性;而两种Cpn特异性基因的PCR检测结果高度一致。在临床常见的呼吸道疾病中,以COPD患者的Cpn感染指标检处率最高,提示Cpn感染可能是COPD发生发展的一个重要原因。结论:1)PCR法和ELISA法均在呼吸道感染患者不同年龄阶段检出较高的Cpn感染指标,说明Cpn是本地区呼吸道感染常见的病原体之一。2)老年人是Cpn感染的高发人群,Cpn感染与COPD的发生关系最密切。3)PBMC中可检出Cpn核酸,而RBC中未检出,说明临床成分输血可以最大限度地减少Cpn通过血液传染的危险。4)Cpn感染引起的临床症状无特异性,并常与其他细菌混合感染。