骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)是一种退行性关节疾病,其特征在于关节的慢性疼痛和运动障碍。尽管目前对OA的潜在机制仍知之甚少,但已提出炎症反应和氧化应激在OA的发生和发展中起重要作用。在炎性刺激中,促炎细胞因子白介素-1β(IL-1β)通过刺激促成软骨降解的多种介质在OA的发病过程中发挥关键作用。关节软骨细胞在维持正常组织合成和胞外基质(ECM)的动态平衡中起重要作用。IL-1β可上调软骨细胞中主要蛋白酶(如MMP)的表达诱导软骨降解,造成活性氧(ROS)的产生和炎症介质例如一氧化氮(NO)释放及一氧化氮合酶的表达增加等,也可以通过损伤线粒体DNA、抑制转录等方式促进软骨细胞凋亡。因此,能够针对IL-1β诱导炎症的药物有望成为有效治疗OA的新策略。鹿茸多肽(VAP)是从鹿茸中分离提取的多肽类活性单体,具有重要的研究价值,已有研究表明其在抑制炎症过程中的重要作用。因此,本课题以提取的兔原代软骨细胞为研究对象,旨在探究VAP对IL-1β诱导的软骨细胞的氧化应激、细胞凋亡和炎症反应的作用及其潜在的分子作用机制。实验所用的鹿茸多肽为本实验室前期提取获得的 32 肽,其氨基酸序列为 VLSATDKTNVLAAWGKVGGNAPAFGAEALERM。另外,通过改良的Hulth法构建骨关节炎动物模型,探究特色配方的中药复方鹿茸补肾汤的抗炎作用。研究结果表明,VAP可在一定范围内有效促进软骨细胞增殖的作用。VAP有效抑制IL-1β处理的软骨细胞中ROS产生,表明VAP具有有效的抗氧化活性。VAP减弱IL-1β诱导后细胞中主要炎性介质NO的产生,且与诱导型一氧化氮合酶iNOS的表达有关。VAP还抑制IL-1β引起的软骨细胞凋亡。此外,VAP下调了用IL-1β处理的软骨细胞中基质金属蛋白酶MMP-2、-9和-13的蛋白表达水平,导致其细胞外分泌减少。另外,VAP恢复了 IL-1β诱导的Smad2/3,P-Smad2/3的表达。这些结果表明,VAP可能通过干预TGF-β/Smad信号通路而表现出抗氧化、抗凋亡及抗炎作用。总的来说,VAP是潜在的可用于OA治疗的有效单体。研究发现,兔子骨关节炎模型组及鹿茸补肾汤灌胃治疗组中,正常机体发生了白细胞系统的紊乱现象且鹿茸补肾汤治疗有一定程度纠正紊乱的趋势,因此,鹿茸补肾汤对骨关节炎的影响有待进一步深入,期待为骨关节炎的中药治理提供更多的实验与理论依据。