肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，其死亡率在我国居各种恶性肿瘤之首。肺癌对人类健康的危害日益严重，直接影响人类的身心健康和生活质量，肺癌死亡率高的主要原因是由于难以早期发现和易于侵袭转移，导致患者手术后五年存活率降低。近年来，许多学者把研究的焦点聚集在肺癌的早期诊断和EMT（上皮间质转化）上。　　 PTN(pleiotrophin)最早是在1989年华盛顿大学医学中心纯化的一种生长因子，当时认为该因子为17KD的蛋白，与肝素具有高亲和性，并首次被命名为HBGF-8(heparin binding growth factor-8)。1990年华盛顿大学的医学中心的进一步研究发现，该因子与当时已知的7个肝素结合生长因子不存在明显的同源性，并因该蛋白具有多种生物学活性而改名为PTN(pleiotrophin)，意为多效蛋白，而更能准确地表达该因子的特性。PTN编码168个氨基酸，与MK存在50％的序列同源性，两者共同组成肝素结合超家族。PTN在多种肿瘤组织及血清中高表达，具有促有丝分裂及促进血管新生的特性，影响肿瘤细胞的血供、生长及转移。研究表明，PTN蛋白在肺癌组织中含量丰富，早期即可在血浆中出现，并且与肿瘤的分期相关，2002年Jajer等用ELASA法检测肺癌患者血清中的PTN表达水平，发现PTN浓度比正常血清中的浓度显著增高，并且与临床病理分期成正相关，与化疗药物成负相关。　　 目的:　　 检测肺腺癌患者术前血清标本及相对应的术后切除肺腺癌组织标本，同时检测肺腺癌患者胸水标本中的PTN蛋白的表达，探讨PTN蛋白在肺腺癌患者三种不同标本中的表达及意义。　　 材料与方法:　　 一、标本收集　　 收集2008年-2010年之间肺腺癌患者的术前血清50例和相对应的肺腺癌患者的术后切除组织标本，50例肺腺癌患者所致的恶性胸水。其中有3例患者既有术前血清，术后组织标本，又有相对应的胸水标本。另收取20例正常献血者血清、20例癌旁组织、20例胸水良性增生细胞作为对照。所有标本均取自于中国医科大学附属第一医院病理科。　　 二、免疫组织化学染色　　 鼠抗人PTN(H-6)(sc-74443)单克隆抗体购自美国Snata公司，兔抗人TTF1单克隆抗体、鼠抗人CK19单克隆抗体、鼠抗人E-ca单克隆抗体、兔抗人vimentin单克隆抗体、S-P超敏免疫组化试剂盒和DAB酶底物显色试剂盒均购自北京中杉生物技术有限公司。染色方法根据试剂盒说明进行。　　 三、Western Blot蛋白印迹　　 将含80μg总蛋白的血清和胸水细胞裂解产物进行10％SDS-PAGE电泳1.5h后，转印至PVDF膜(50V，2h)，脱脂奶粉室温封闭2h，经TTBS冲洗3次，抗PTN单克隆抗体(1：100)4℃孵育过夜后，辣根过氧化物酶标记二抗37℃孵育2h，TTBS洗三次后ECL发光。以β-actin为内对照，比较各条带灰度值。　　 四、统计分析　　 应用SPSS13.0统计软件进行数据处理，采用X2检验（不满条件时用Fisher确切概率法）分析各组计数资料，P＜0.05为差异有:计学意义。　　 结果:　　 1、PTN在正常献血者血清中未见特异性条带，在肺腺癌患者的血清中可见有特异性条带，其中Ⅳ期肺腺癌患者的血清PTN蛋白表达水平明显高于Ⅰ期肺腺癌患者的血清PTN蛋白表达水平。　　 2、PTN在肺腺癌组织中的阳性率40％(20/50)高于癌旁正常组织中的阳性率0％(0/20)，其中在肺腺癌组织中PTN蛋白的表达与年龄、性别、分化程度无关，与临床分期和淋巴结有无转移有关，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。　　 3、PTN蛋白在恶性胸水腺癌细胞中的阳性率62％(31/50)高于胸水良性增生细胞中的阳性率0％(0/20)，差异具有统计学意义(P＜0.05)。　　 4、PTN蛋白在恶性胸水腺癌细胞中可见有特异性条带，在胸水良性增生细胞中未见特异性条带。　　 5、PTN蛋白在肺腺癌患者胸水细胞中的阳性率62％(31/50)高于组织中的阳性率40％(20/50)、组织中的阳性率40％(20/50)高于肺腺癌患者血清中的阳性率18％(9/50)，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。并且，在3例分别来源于同一例患者的这三种标本中，PTN和Vimentin在血清和肺腺癌组织中阴性表达，E-ca阳性表达；但在相对应的恶性胸水腺癌细胞中PTN和Vimentin呈阳性表达，E-ca阴性表达。　　 结论:　　 1、PTN在肺腺癌患者的血清中可见有特异性条带，并且Ⅳ期表达水平明显高于Ⅰ期表达水平，提示Western-blot方法可以检测出PTN蛋白的表达，并能初步预测临床分期。　　 2、PTN在肺癌组织中高表达，且其表达与临床分期和淋巴结转移密切相关，提示其表达在肺癌的侵袭转移过程中起到促进作用。　　 3、PTN在胸水细胞中的阳性率高于组织和血清中的阳性率，并且在来源于同一例患者的三种标本中，PTN在血清和组织中阴性表达，在胸水细胞中阳性表达，进一步提示其表达在肺癌的侵袭转移过程中起到促进作用。