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目的:探讨超抗原葡萄球菌肠毒素B(Staphylococcal entertoxic B,SEB)刺激NK细胞后对其杀瘤活性的影响。
方法:分别采用补体裂解法及绵羊红细胞法分离富集NK细胞,比较两种方法获得的NK细胞纯度及活性。用10-9g/ml、10-8g/ml、10-7g/ml、10-6g/ml浓度的SEB作用NK细胞,于作用12小时、24小时、36小时及48小时后加入靶细胞K562细胞株,以MTT法测定NK细胞的杀瘤活性。用正交设计选择NK细胞最佳杀瘤条件,并比较SEB对NK细胞及外周血单个核细胞杀瘤活性的影响。
结果:通过对补体裂解法和绵羊红细胞法分离富集NK细胞的比较,前者获得NK细胞方法优于后者。杀瘤活性检测结果表明: SEB 作用12小时后,NK细胞及外周血单个核细胞的杀瘤活性开始增强,至作用24小时杀瘤活性达最佳。SEB能够促进NK细胞及外周血单个核细胞杀瘤活性;且在一定浓度范围内,NK细胞及外周血单个核细胞的杀瘤活性与SEB的浓度呈正相关;SEB的浓度达到一定后,增加SEB的含量不能提高NK细胞及外周血单个核细胞的杀瘤活性。受到SEB作用后,在同样条件下,NK细胞的杀瘤活性高于外周血单个核细胞的杀瘤活性。随着效应细胞数量的增大,NK细胞及外周血单个核细胞的杀瘤活性增加。