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[背景]肝损伤引发的各种肝脏疾病严重威胁着人们的健康,肝脏持续的氧化应激和炎症在肝损伤的发生和发展中起着重要的作用。其中肝脏的炎症在肝脏中具有双重作用,对维持组织的健康至关重要。一旦炎症反应过度或失调就会成为病理性炎症和组织损伤的关键驱动因素,恶化肝损伤病程。传统医学的整体观和辨证论治在综合治疗肝损伤方面具有独特的优势,中药和民族药因其多靶点、多成分的特点,在治疗急性肝损伤方面具有显著优势。[目的]本课题采用四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠急性肝损伤模型,考察维药斯米孜·欧提防治急性肝损伤的作用,探讨维药斯米孜·欧提肝保护作用的分子机制,并预测筛选以S100A8/A9为靶点的低毒高效的斯米孜·欧提活性成分。[方法]本课题以CCl4诱导的小鼠急性肝损伤模型为研究对象,将60只SPF级雄性昆明小鼠随机分为正常组、模型组、水飞蓟宾组(200 mg·kg-1)及斯米孜·欧提高(2g·kg-1)、中(1 g·kg-1)、低(0.5 g·kg-1)剂量组。灌胃给药5 d后,除正常组小鼠外,其余各组小鼠腹腔注射0.2%CC14花生油溶液10 mL·kg-1诱导肝损伤,建立急性肝损伤模型。造模23 h后,收集血清和肝脏组织。全自动生化分析法检测小鼠ALT、AST、TBIL等血清肝功能指标;采用苏木素-伊红(HE)联合染色法对肝脏组织病理切片染色,观察肝脏病理学变化;应用转录组测序技术(RNA-seq)分析肝脏差异基因及GO功能、KEGG富集情况,并利用实时荧光定量反应(Real-time PCR)检测Hsp90、C/EBPβ、CCL2、S100A8和S100A9基因表达量,蛋白质印迹法(Western blot)检测S100A9蛋白质表达水平,酶联免疫法(ELISA)检测血清中S100A8、S100A9和S100A8/A9浓度。采用分子对接、药物相似度、ADMET等方法对斯米孜·欧提中的抗炎、免疫调节化学成分进行筛选。[结果]1.维药斯米孜·欧提的肝保护作用研究与正常组比较,模型组小鼠的丙氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST),乳酸脱氢酶(LDH),总胆红素(TBIL)水平均明显升高(P<0.01);与模型组比较,斯米孜·欧提显著降低急性肝损伤小鼠ALT,AST和LDH水水平(P<0.05,P<0.01)。斯米孜·欧提明显改善了肝细胞水变性、肿胀、坏死、炎性细胞浸润等病理现象。2.维药斯米孜·欧提对CCl4诱导急性肝损伤的保护作用机制研究与正常组比较,模型组小鼠肝脏Hsp90、C/EBPβ、CCL2、S100A8和S100A9基因表达量显著升高(P<0.05,P<0.01),血清S100A8和肝脏S100A9蛋白质水平显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组相比,斯米孜·欧提高剂量组小鼠肝脏Hsp90、C/EBPβ、CCL2、S100A8和S100A9基因表达量显著降低(P<0.05,P<0.01),血清 S100A8、S100A8/A9 和肝脏 S100A9 蛋白质水平显著降低(P<0.05,P<0.01)。3.以S100A8/A9为靶点的维药斯米孜·欧提抗炎活性成分计算机模拟筛选研究从scifinder和PubChem数据库收集到70种斯米孜·欧提化合物,与S100A8/A9强结合的斯米孜·欧提化合物有16种,其中portulacerebroside D、N-trans-hibiscusamide、oleraciamide B 可以与 S100A8/A9 形成氢键。oleraciamide B、N-cis-hibiscusamide 和 portulene 的类药物性能较好,其次为N-trans-hibiscusamide、racemic oleracein E、cycloartenol和lupeol。[结论]1.斯米孜·欧提可以通过调控小鼠肝脏Hsp90、C/EBPβ、S100A8、S100A9和CCL2的mRNA表达和血清S100A8、S100A8/A9水平,影响炎症反应的扩大和炎症细胞的募集,从而减轻CCl4诱导的急性肝损伤。2.斯米孜·欧提中的 oleraciamide B、N-trans-hibiscusamide 对指定靶点S100A8/A9具有较低毒性和较好药理活性,这些化合物有望在对抗炎症性疾病中发挥优势作用。