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本研究以我国北方重要的肉食性海水鱼类大菱鲆（Scophthalmus maximus L.）为研究对象,比较研究大菱鲆对水解鱼蛋白和水解牛蛙蛋白的利用差异,并进一步探讨水解鱼蛋白对大菱鲆肠道健康的影响,以期为蛋白水解物在大菱鲆饲料中的应用提供理论依据。具体研究内容包括以下3个部分:1.大菱鲆利用鱼和牛蛙蛋白水解物的比较研究为探究大菱鲆对不同来源水解蛋白的利用效率,本实验选取太平洋狭鳕鱼和牛蛙下脚料为蛋白来源,制备水解鱼蛋白和水解牛蛙蛋白,研究对象是初始体重为（8.00±0.01g）的大菱鲆,进行为期56d的养殖实验。实验设2个对照组,正对照组（PC）鱼粉含量为35%,负对照组（NC）鱼粉含量为26.5%;设2个实验组,水解鱼组（FPH）为26.5%的鱼粉和8.0%的水解鱼蛋白,水解牛蛙组（BPH）为26.5%的鱼粉和9.5%的水解牛蛙蛋白,配制成4组等氮等脂的饲料。结果显示,FPH组的终末体重、增重率和特定生长率显著高于BPH组和NC组（P＜0.05）,与PC组无显著性差异（P＞0.05）。摄食6h后,食糜必需氨基酸中赖氨酸、精氨酸、苏氨酸和缬氨酸在BPH组的含量显著高于PC组（P＜0.05）;多数非必需氨基酸在BPH组含量最高,但无显著性差异。质子偶联氨基酸转运载体PAT1和小肽转运载体Pep T1的m RNA表达量分别在FPH组和BPH组都显著高于PC组和NC组（P＜0.05）;碱性氨基酸转运载体CAT1和y+L型氨基酸转运载体y+LAT2的m RNA表达量在各处理组中无显著性差异（P＞0.05）。研究表明,在饲料中添加鳕鱼、牛蛙蛋白水解物均能提高大菱鲆的生长性能,且水解鱼蛋白的促生长效果好于水解牛蛙蛋白。食糜氨基酸含量及氨基酸和小肽转运载体表达量的结果,也表明大菱鲆对添加水解鱼蛋白的饲料利用效率优于水解牛蛙蛋白。2.不同水平水解鱼蛋白对大菱鲆生长性能及氨基酸消化吸收的的影响为探究不同水平水解鱼蛋白对大菱鲆生长性能及氨基酸消化吸收的影响,本实验在之前研究水解鱼蛋白对大菱鲆生长性能的基础上,设计适宜水平和过量高水平水解鱼蛋白2个梯度,其中适宜水平水解鱼蛋白组的水解鱼蛋白添加量为10%,记作FPH10,高水平水解鱼蛋白组的水解鱼蛋白添加量为30%,记作FPH30;另外,设正对照和负对照2个对照组,正对照组鱼粉为36%,记作HFM,负对照组鱼粉为24%,记作LFM,配制成4组等氮等脂的饲料。以初始体重为（25.50±0.05g）的大菱鲆为研究对象,进行为期60d的养殖实验。结果显示,FPH10组的终末体重、增重率、特定生长率和蛋白质沉积率显著高于FPH30组（P＜0.05）,与HFM组和LFM组无显著性差异（P＞0.05）。4个处理组的干物质消化率、蛋白质消化率均无显著性差异（P＞0.05）,粪便粗蛋白FPH30组显著低于其余3组（P＜0.05）。赖氨酸、甘氨酸的氨基酸表观消化率在FPH30组显著高于FPH10组（P＜0.05）;脯氨酸在FPH10组显著高于HFM组和FPH30组（P＜0.05）。摄食6h后,中肠食糜中所有必需氨基酸和部分非必需氨基酸在FPH30组显著低于其余3组（P＜0.05）,后肠食糜中缬氨酸、亮氨酸、酪氨酸和丙氨酸在FPH10组和FPH30组都显著低于正负对照组（P＜0.05）。中肠钠离子中性氨基酸转运载体b0+AT在HFM组、FPH10组和FPH30组的表达量显著高于LFM组（P＜0.05）,后肠小肽转运载体Pep T1a表达量在LFM组显著高于FPH30组（P＜0.05）,与HFM组和FPH10组无显著性差异（P＞0.05）,小肽转运载体Pep T1b表达量在LFM组显著高于FPH10组与FPH30组（P＜0.05）,与HFM组无显著性差异（P＞0.05）。研究表明,从食糜氨基酸组成来看,高水平水解鱼蛋白被消化的速度快于适宜水平水解鱼蛋白。因此,适宜水平水解鱼蛋白促进大菱鲆的生长,高水平水解鱼蛋白抑制生长。适宜水平和高水平水解鱼蛋白都能上调氨基酸转运载体的表达量,而高水平水解鱼蛋白则下调小肽转运载体Pep T1的表达水平。3.不同水平水解鱼蛋白对大菱鲆肠道健康的影响为探究不同水平水解鱼蛋白对大菱鲆肠道健康的影响,本实验在第三章饲料添加适宜水平水解鱼蛋白对大菱鲆促生长效果比高水平好的基础上,进一步研究不同水平水解鱼蛋白对大菱鲆肠道食糜相关酶活、肠道组织形态、肠道微生物多样性以及肠道粘膜屏障的影响。研究结果表明,中肠食糜中谷丙转氨酶和谷草转氨酶在FPH30组活力都是强于FPH10组,二者在后肠食糜中则无显著性差异（P＞0.05）。谷胱甘肽还原酶、硝酸还原酶活力在中肠食糜和后肠食糜都是FPH30组高于FPH10组。中肠食糜中短链脂肪酸乙酸的含量在FPH30组显著高于HFM组（P＜0.05）,而在后肠食糜中4个处理组则无显著性差异（P＞0.05）。肠道肠绒毛高度和肌层厚度在FPH10组、HFM组显著高于FPH30组、LFM组（P＜0.05）,肠绒毛宽度四个处理组都没有显著性差异（P＞0.05）。从肠道形态结果看,FPH10组的肌层组织结构比较完整,绒毛多且整齐,而FPH30组肌层组织结构受损,且绒毛数量少且乱杂。中肠粘膜和食糜的微生物多样性在4个处理组均无显著性差异（P＞0.05）,后肠粘膜的菌群多样性指数在HFM组显著高于FPH30组（P＜0.05）,物种均匀度的指数在HFM组显著高于FPH30组（P＜0.05）。FPH10组的优势菌和HFM组接近,分别为厚壁、变形菌门,而FPH30组的优势菌为蓝细、变形菌门。黏蛋白（Mucin-2）、闭合蛋白（Claudin-3）在中肠中FPH30组显著上调（P＜0.05）,闭合蛋白（Claudin-4）在中肠FPH10组和FPH30组显著上调（P＜0.05）。IL-1β在中肠粘膜中FPH30组、LFM组显著高于HFM组、FPH10组（P＜0.05）,后肠粘膜中FPH30组显著低于其余3组（P＜0.05）;其余免疫因子IL-10、NF-κB、TNF-α、TGF-β、PPAR-γ、s Ig A在后肠粘膜中4个处理组均无显著性差异（P＞0.05）。研究表明,高水平水解鱼蛋白不利于肠绒毛的生长且破坏了肠道形态结构的完整性。同时,适宜水平的水解鱼蛋白能够增加绒毛长度宽度和肌层厚度,对肠道组织结构具有积极的影响。高水平的水解鱼蛋白会降低肠道微生物的多样性和物种均匀度。另外,适宜水平水解鱼蛋白能够上调肠道机械屏障相关基因如粘蛋白、闭锁蛋白、闭合蛋白和紧密连接蛋白的表达,从而对肠道机械屏障产生积极的影响;水解鱼蛋白对肠道免疫屏障也具有积极作用。