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阿尔茨海默症（Alzheimer’s disease,AD）是一种常发生在老年人中的神经系统类疾病,临床症状表现为认知功能障碍、记忆力衰退、生活自理能力丧失并伴有人格和情感的改变。目前关于它的发病机制还没有得到明确的阐述,迄今为止还没有治愈该疾病的药物。市面上基于靶点抗AD药物发展缓慢,且临床治疗效果欠佳。针对AD的多发病机制,我们需要寻找一种全面的治疗手段。随着分析技术的不断进步,已有研究表明中药可以通过多途径、多靶点的方式起到发挥治疗AD的效果。因此,本论文从治疗AD的经典名方定志小丸（人参、远志、茯苓和石菖蒲）入手,建立阿尔茨海默症大鼠模型,从代谢组学角度探讨定志小丸治疗AD的整体作用机制,为定志小丸的临床研究提供理论和实验依据。本论文包括以下主要内容:实验方法:（1）AD大鼠模型的建立:大鼠大脑海马区注射Aβ25-35的方法建立AD大鼠模型,注射位点的选取:前囟后3.0 mm,中线旁2.0 mm,到达硬膜下2.8 mm。注射器流速设置为1μL/min,注射5 min,对侧大脑采用相同方法处理。手术1周后开始灌胃给药,定志小丸:5.5 g/kg/d,阳性药多奈哌齐:0.167 mg/kg/d,其余组别给予等量的蒸馏水。给药30天后。开始进行水迷宫实验,记录成绩。（2）定志小丸治疗AD大鼠尿液代谢组学研究:行为学实验结束后,收集大鼠12 h的尿液,基于UPLC-Q-TOF-MS技术结合多变量分析方法开展尿液代谢组学研究。（3）我们采用基于UPLC-TQ-MS技术的定量方法,考察了日内、日间精密度和准确度、定量限、检测限、基质效应、加样回收率等方法学指标,对模型大鼠大鼠尿液潜在生物标记物进行了定量研究。（4）基于课题组前期研究结果:刺五加根30%乙醇洗脱组分体外抗氧化活性最强,且能改善帕金森（Parkinson’s disease）模型小鼠的症状。为了进一步研究该组分发挥活性作用的物质基础,基于UPLC-Q-TOF-MS/MS分析技术对该组分进行了成分鉴定。同时选用单胺氧化酶B（MAO-B）作为靶点蛋白,采用亲和超滤质谱技术从刺五加根30%乙醇洗脱组分中筛选出与MAO-B结合的活性小分子化合物。实验结果:Morris行为学实验表明AD模型大鼠造模成功,定志小丸能改善AD大鼠学习记忆能力。基于尿液代谢组学的分析结果:一共鉴定出28个内源性生物标记物,包括:牛磺酸、尿酸、柠檬酸、肌酐、半胱氨酸等,共涉及了12条代谢通路,给药后这些生物标记物相对含量向着正常组大鼠方向调节。分析得出定志小丸改善AD大鼠认知功能的机理:抗氧化应激、调节氨基酸代谢、能量代谢、保护神经元、改善肠内菌群代谢。靶向定量代谢组学一共定量出15个潜在生物标记物,从定量代谢组学角度对非靶向代谢组学结果进行了验证。刺五加根30%乙醇洗脱组分中共鉴定出包括有机酸类化合物、香豆素类化合物、木脂素类化合物共19个化合物。体外酶抑制活性实验显示刺五加根组分对MAO-B的半数抑制浓度IC50=1.611 mg/m L,表明该组分具有抑制MAO-B的活力。亲和超滤质谱分析结果显示,共有9个化合物与MAO-B结合,其中根据色谱峰面积计算出结合强度最大的物质为刺五加苷E。