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长期以来,病毒感染诱导Ⅰ型干扰素表达的过程一直是细胞抗病毒天然免疫研究的热点。宿主细胞通过自身的模式识别受体(pattern recognition receptors, PRRs)识别病原微生物的病原相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns, PAMPs),从而启动下游信号级联反应,诱导Ⅰ型干扰素(typeⅠinterferons)、促炎症细胞因子(proinflammatory cytokines)和趋化因子等的产生。在病毒感染宿主细胞的过程中,病毒的核酸可以被Toll样受体(Toll-likereceptors, TLRs)(如TLR3、7和9)、RIG-I样受体(RIG-I like receptors, RLRs)(如RIG-I和MDA5)和近年来发现的DNA受体(如DAI和IFI16)识别。其中RIG-I和MDA5识别病毒RNA后,招募其下游接头蛋白VISA(也叫MAVS、IPS-1和Cardif),一方面通过招募TRAF2/6活化IKK激酶复合物,激活转录因子NF-κB;另一方面通过招募TRAF3和TBK1,促进IRF3的磷酸化激活。活化的转录因子NF-κB和IRF3进入细胞核后,协同促进Ⅰ型干扰素基因的表达。MITA(也叫STING)是近年来发现的RLRs介导的抗病毒信号转导中另一个重要的接头蛋白,它通过与VISA相互作用,病毒感染后招募TBK1,通过自身寡聚化形成VISA-MITA-TBK1-IRF3复合物,促进TBK1对IRF3的磷酸化激活,从而介导Ⅰ型干扰素的表达。细胞抗病毒天然免疫中,宿主细胞对病毒感染的识别一直是研究的热点问题。尽管近十几年来的研究发现了许多PRRs,揭示了天然免疫中宿主对病原微生物的识别机制,但许多问题仍然需要进一步的研究。为了寻找参与病毒诱导的Ⅰ型干扰素信号转导的未知信号分子,我们以pGL3-ISRE为报告基因,进行了基因筛选。我们的研究发现,LSM14A能有效激活ISRE和IFN-p启动子,并显著协同仙台病毒(Sendai virus,SeV)和单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type, HSV)感染诱导的Ⅰ型干扰素的表达。下调内源性LSM14A的表达显著抑制SeV感染早期诱导的Ⅰ型干扰素表达,同时,也抑制胞质dsRNA和dsDNA诱导的IFN-p启动子的激活。水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)空斑实验和新城疫病毒(Newcastle Disease virus, NDV)复制水平检测实验表明,LSM14A有效抑制病毒在细胞内的复制。此外,我们还发现LSM14A可以直接结合病毒RNA和DNA,作为一种新型胞质病毒核酸受体,通过与RIG-I或VISA相互作用,介导病毒感染诱导的Ⅰ型干扰素的表达。为了进一步研究MITA在RLRs介导的抗病毒信号转导中的调控机制,我们进行了Flag-亲和层析实验,通过质谱分析鉴定得到了MITA相互作用蛋白ISG56。ISG56是最早被鉴定出可被病毒和Ⅰ型干扰素诱导表达的蛋白之一。我们的研究发现,过量表达ISG56抑制SeV感染诱导的IRF3、NF-κB和IFN-p启动子的激活；下调内源性ISG56的表达则得到相反的结果。同样的,过量表达ISG56抑制poly(I:C)诱导的抗病毒反应,促进VSV的复制；而下调内源性ISG56的表达则抑制VSV的复制。竞争性免疫共沉淀实验表明,ISG56通过与MITA结合,阻断MITA与其上游分子VISA和下游分子TBK1的相互作用。我们的研究表明,ISG56负反馈调控病毒感染诱导的Ⅰ型干扰素表达和细胞抗病毒反应。我们的研究发现,LSM14A可能作为一种新型病毒核酸受体,参与病毒感染诱导的Ⅰ型干扰素表达的信号转导,这将为细胞抗病毒天然免疫提供一种新的病原分子识别机制。此外,我们还发现了ISG56作为Ⅰ型干扰素诱导蛋白,负反馈调节病毒感染诱导Ⅰ型干扰素的表达,此项研究揭示了一种新的抗病毒天然免疫信号转导负反馈调控机制。