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本研究分为二部分:
第一部分:正常妊娠母胎界面中骨桥蛋白的表达
目的:
通过检测骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在正常早、中、晚孕期的绒毛、胎盘及蜕膜组织中的表达情况来探讨其在妊娠期中的可能作用。
方法:
分别采用免疫组化(S-P法)及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测正常早、中、晚孕期孕妇各20例的绒毛及蜕膜组织中OPN蛋白定位、含量及mRNA的表达水平。
结果:
OPN在正常早、中、晚孕期的绒毛及蜕膜组织中均有表达,主要定位于细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞的胞膜和胞质中;在蜕膜上皮组织的胞膜、胞质中亦呈阳性表达;此外在绒毛间质及血管中也呈阳性表达。OPNmRNA及蛋白在各组中的表达情况:
各孕期绒毛组织中,从早孕期至中、晚孕期表达依次升高(各组间比较均P<0.05);
蜕膜组织中,早孕期中的表达量分别高于中晚孕期(均P<0.05),而在中、晚孕期之间的表达量无明显差异(P>0.05)。
结论:
在胚胎发育进程中,绒毛中OPN的表达量随孕周增加而增加,而蜕膜中以早孕期时表达最强,我们推测OPN在妊娠早期可能更多是参与调节绒毛侵入作用,而在中晚孕期可能更多的是参与维持免疫调节作用。
第二部分:早期自然流产患者母胎界面中骨桥蛋白的表达
目的:
通过检测早期自然流产患者绒毛及蜕膜组织中OPN的表达情况,来探讨OPN在早期自然流产疾病发生过程中的可能作用。
方法:
分别采用免疫组化染色法(S-P法)及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测20例早期自然流产者(自然流产组)及20例正常早期人工流产者(正常妊娠组)的绒毛及蜕膜中OPN蛋白定位、含量及mRNA的表达水平。
结果:
OPN在正常妊娠组和自然流产组中的绒毛及蜕膜组织中均有表达,主要定位于细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞的胞膜和胞质中;在蜕膜上皮组织的胞膜、胞质均呈阳性表达。OPNmRNA及蛋白在两组中的表达情况:绒毛组织中,自然流产组表达水平低于正常妊娠组,其差异有统计学意义(P<0.05);蜕膜组织中,自然流产组表达水平亦低于正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:
OPN对妊娠早期绒毛侵入和免疫维持有着一定的作用。绒毛及蜕膜组织中OPN的低表达可能是导致早期自然流产的原因之一。