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第一部分miR-1246靶向Kindlin-2调控宫颈癌细胞的迁移和侵袭目的:筛选并确认miR-1246调控宫颈癌细胞迁移和侵袭的功能性靶基因。方法:利用生物信息学数据库预测miR-1246的潜在靶基因,并结合文献和基因表达水平,挑选出目标靶基因;Western blot探究miR-1246对靶基因蛋白表达的作用;双荧光素酶报告基因实验确认miR-1246与目标靶基因的具体结合位点;分别使用RT-qPCR和免疫组化检测临床标本miR-1246和靶基因的表达,分析两者表达相关性;回复实验验证靶基因在miR-1246调节细胞迁移和侵袭过程中的必要性。结果:Kindlin-2被筛选作为目标靶基因;RT-qPCR和免疫组化结果表明miR-1246和Kindlin-2在宫颈癌组织中表达负相关;Western blot结果显示miR-1246能下调Kindlin-2的表达;双荧光素酶报告基因试验确认Kindlin-2的3`UTR与miR-1246的结合位点;回复实验证实Kindlin-2能逆转miR-1246诱导的细胞迁移和侵袭。结论:Kindlin-2是miR-1246的靶基因,miR-1246通过与Kindlin-2的3`UTR的位点结合,下调Kindlin-2的表达,促进宫颈癌细胞的迁移和侵袭。第二部分Kindlin-2通过AKT/mTOR介导的自噬抑制宫颈癌细胞迁移和侵袭目的:探究Kindlin-2对宫颈癌细胞自噬、迁移和侵袭的调控及具体机制,分析Kindlin-2在宫颈癌中的表达情况,及其与临床病理因素和患者预后的关系,探讨Kindlin-2在宫颈癌中的生物学功能和临床意义。方法:利用生物信息学数据库和临床标本分析Kindlin-2在宫颈癌中的表达情况。在两株宫颈癌细胞系中分别上调和下调Kindlin-2,使用Western blot检测自噬相关蛋白,共聚焦显微镜检测自噬流,电子显微镜观测自噬超微结构,以探究Kindlin-2对细胞自噬的影响。Western blot检测下游通路蛋白的变化情况,回复实验探究通路在Kindlin-2调节细胞自噬过程中的必要性。划痕实验和Transwell实验探究Kindlin-2对细胞迁移和侵袭的作用,回复实验探究自噬在Kindlin-2调节细胞迁移和侵袭过程中的必要性。RT-qPCR检测Kindlin-2在宫颈癌组织中的表达水平,并分析其与临床病理因素的联系。结合公开数据库,探究Kindlin-2表达水平与患者预后的关系。结果:在宫颈癌组织中,Kindlin-2的m RNA和蛋白质水平均下调。Kindlin-2增加了自噬蛋白标志物LC3-Ⅱ,同时降低了p62的表达水平;自噬流检测结果显示Kindlin-2增加了黄色光点和红色光点的数量;透射电镜观察到Kindlin-2提高了自噬体和自噬溶酶体数量。Western blot表明Kindlin-2降低了p-AKT和p-mTOR的表达水平,回复实验表明,Kindlin-2对自噬的调控依赖于AKT/mTOR通路。划痕实验和Transwell实验表明Kindlin-2抑制了细胞的迁移和侵袭,回复实验表明自噬是这一过程所必需的。Kindlin-2低表达与较深的间质浸润深度和较高的淋巴结转移率有关,同时与较短的DFS有关。结论:Kindlin-2通过AKT/mTOR通路介导的自噬抑制宫颈癌细胞的迁移和侵袭,Kindlin-2低表达提示宫颈癌预后不良。第三部分基于自噬相关基因建立宫颈癌的预后模型目的:通过生物信息学方法对高通量基因表达数据进行分析,基于自噬相关基因（ATGs）表达谱建立一个宫颈癌的预后预测模型。方法:从癌症和肿瘤基因图谱（TCGA）和基因表达汇编（GEO）数据库中获取宫颈癌病例的基因表达谱和临床资料,从人类自噬数据库（HADb）中获取ATGs列表。将TCGA病例随机平均分到训练集和测试集中,在训练集中进行单因素Cox回归分析,初步筛选出与患者预后相关的ATGs,然后通过最小绝对收缩和选择算子（LASSO）回归进一步缩小基因数量。根据多因素Cox回归系数与基因表达量构建预后模型,计算每个病例的风险评分,根据风险评分将病例分为高风险组和低风险组。通过Kaplan-Meier生存分析和受试者工作特征（ROC）曲线对预后模型的预测效能进行评估。多因素分析以及分层分析评估预后模型的独立预后价值。使用基因本体论（GO）以及京都基因与基因组百科全书（KEGG）对模型中的ATGs及其相关基因进行富集分析,基因集富集分析（GSEA）探究高危组患者的基因富集通路,揭示该预后模型可能的作用机制。结果:单因素Cox分析显示33个ATGs与训练集患者预后相关,然后用LASSO回归方法筛选出其中8个基因（VEGFA、TM9SF1、NAMPT、KLHL2、HSPA8、HSP90AB1、HGS、ATG4D）构建预后模型。该模型能将TCGA和GEO数据集中的宫颈癌患者分为预后明显不同的高风险和低风险组,ROC分析表明1年、3年和5年生存期的曲线下面积分别为0.746,0.750和0.791。多因素分析以及分层分析进一步证实了该模型的独立预后价值。此外,GO、KEGG和GSEA分析揭示了预后模型相关的几个基本信号通路和生物过程。结论:我们构建并验证了一个新的基于8个ATGs的预后模型,它可以作为宫颈癌患者的独立预后因素。