线粒体蛋白OPA1在子痫前期患者血清及胎盘中的表达及意义

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目的:分析线粒体蛋白OPA1在对照组、早发及晚发子痫前期组患者外周血血清及胎盘组织中的表达水平,分析其血清及胎盘组织中的表达是否呈一致性,结合临床指标分析临床意义,探讨与子痫前期发生发展及临床分型是否有相关性。方法:(1)研究对象:选择吉林大学第二医院2021.04-2022.02行剖宫产术终止妊娠的早发型子痫前期27例,晚发型子痫前期26例,同期无合并症正常妊娠对照组30例。诊断标准依据《妇产科学(第9版)》,34周前发现的子痫前期定义为早发型子痫前期。本研究通过吉林大学第二医院伦理委员会批准。(2)样本采集:取终止妊娠前48h内孕妇外周静脉血4ml,4℃,以每分钟4000转速度离心15分钟后取上清至1.5ml EP管中,然后存至-80℃冰箱待检。胎盘组织块的收集在剖宫产术中胎盘娩出后取靠近脐带根部3小块胎盘组织(大小约1.0cm~3),避开钙化、出血及坏死区域,胎盘组织块在生理盐水下冲洗5遍后用无菌纱布吸干水分,一份置于2.5%戊二醛中,一份置于福尔马林中,一份置于液氮中过夜后冻存于-80℃冰箱。(3)实验方法:通过透射电镜观察胎盘组织滋养细胞的线粒体结构、形态;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中OPA1的含量;胎盘组织中OPA1蛋白的表达水平采用免疫蛋白印迹(Western-Blot)及免疫组化(SP法)检测。统计学分析用SPSS 26.0,同时结合入组患者临床资料进行相关性分析。结果:(1)通过电镜观察发现,对照组中滋养细胞表面的绒毛排列整齐,细胞内线粒体呈圆形或椭圆形,排列规整,线粒体嵴结构清晰。子痫前期胎盘滋养细胞表面绒毛排列紊乱,细胞内可见线粒体嵴结构断裂或消失,线粒体肿胀呈空泡状。(2)通过ELISA实验发现,与晚发子痫前期组、对照组相比,血清中OPA1浓度在早发子痫前期组中明显降低(p<0.01)差异有显著统计学意义。(3)通过Western-Blot实验发现,L-OPA1在三组患者胎盘组织中的蛋白表达水平无差异性;但与对照及晚发子痫前期组相比,S-OPA1蛋白在早发子痫前期胎盘组织中的表达明显降低,p<0.05差异比较有意义。(4)通过免疫组化染色发现,OPA1蛋白主要在合体滋养细胞胞浆中表达,在早发子痫前期组呈低表达,对照组中呈强阳性表达。OPA1在早发子痫前期中的蛋白表达水平与其余两组相比明显降低,p<0.05差异比较有意义。(5)通过Pearson相关性分析发现,外周血血清OPA1浓度与胎盘组织中S-OPA1蛋白的表达呈正相关(p<0.01)。血清中OPA1浓度及胎盘中S-OPA1蛋白的表达与患者收缩压及舒张压水平有负相关性(p<0.01)。结论:(1)血清OPA1及胎盘组织中S-OPA1低表达引起线粒体结构损伤、功能障碍,可能参与早发子痫前期发生发展。(2)血清OPA1水平及胎盘组织中S-OPA1蛋白表达在早发子痫前期中呈一致性,并与患者血压水平有相关性,血清OPA1浓度有可能成为早发子痫前期患者风险评估的指标。(3)线粒体蛋白OPA1对晚发型子痫前期的发生发展有待进一步研究。
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