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菊花(Dendranthema grandiflorum (Ramat) Kitamura)不仅是我国的传统名花和主要切花之一,而且是许多国家和地区重要的经济花卉。但绝大多数菊花在深秋开花,其商品性和观赏性受到季节的严格限制。近年来一些花发育调控基因被应用于菊花基因工程中,以期改良菊花的花期特性。SOC1基因是调控拟南芥开花通路中的一个关键基因,该基因在菊花基因工程中的应用研究尚未见报导。本研究选择大菊品种‘黄金虎’,建立了高效的不定芽再生体系和稳定的遗传转化体系,构建了胁迫诱导型启动子rd29A调控下SOC1的新型表达载体,并将其转化菊花,获得了13株转基因植株,并对转基因植株进行了胁迫处理研究,以期获得花期可控的菊花新种质。主要结果如下:1.筛选得到了适合菊花‘黄金虎’叶片的不定芽再生体系为MS+3 mg/16-BA+1.7 mg/1NAA,再生频率高达96.7%;2.构建了新型的植物表达载体PV003:依托改造的pCambia2300为载体,连接了rd29A启动子,在启动子下游插入了开花基因SOC1。并将构建好的载体导入农杆菌LBA4404;3.设计实验筛选了转化最适的选择标记抗生素卡那霉素的浓度为10 mg/l,抑菌抗生素头孢霉素的浓度为75 mg/1。生根筛选添加的卡那霉素浓度也为10 mg/l;4.通过比较不同预培养时间、菌液浓度、侵染时间对转化的影响,建立了适合菊花‘黄金虎’最佳的遗传转化体系:将未经预培养的叶片外植体,在OD600=0.8的菌液浓度下侵染12 min,然后转接于无抗的不定芽再生培养基上黑暗共培养2 d,再进行抗性筛选;5.经卡那霉素筛选转化的205个外植体,共获得71株抗性苗,对筛选出的抗性苗进行PCR检测有13株为阳性苗,转化率为6.34%;6.通过250 mM的NaCl。胁迫处理Y4等7株转化苗,半定量RT-PCR分析SOC1基因表达水平,结果显示:在不同的转化株中,SOC1基因的表达有不同水平的增加;干旱胁迫处理Y4植株6 d后,SOC1的表达也明显上调。这不仅说明外源基因在转化株中能够正常表达,而且转化株中的外源基因能够受到盐和干旱胁迫条件的诱导。