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目的:观察还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)对蝮蛇毒致小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)中肺泡表面活性物质基因表达水平的影响,探讨还原型谷胱甘肽对蝮蛇毒致急性肺损伤的保护作用。方法:1.分组:60只昆明小鼠(40±5g),完全随机法分为以下6组:A组(腹腔注射0.9%NS)、B组(腹腔注射GSH 1800mg/Kg)、C组(腹腔注射蝮蛇毒素0.75mg/kg)、D组(腹腔注射蝮蛇毒素0.75mg/kg+GSH 1800mg/Kg)、E组(腹腔注射蝮蛇毒素1.0mg/kg)、F组(腹腔注射蝮蛇毒素1.0mg/kg+GSH1800mg/Kg)。2.建立蝮蛇毒致小鼠ALI模型:(1)除A、B组外,另外4组分别腹腔注射不同剂量江浙蝮蛇冻干粉溶液,A、B组腹腔注射等容积0.9%NS。(2)3h后,B、D、F组分别腹腔注射1800mg/kg剂量的还原型谷胱甘肽,A、C、E组腹腔注射等容积0.9%NS。(3)注射还原型谷胱甘肽5 h后,将各组实验动物处死并采集肺脏标本。3.测定实验设计检测指标:(1)制作肺组织石蜡切片并行HE染色,光学显微镜下观察病理学变化并行肺损伤病理评分;(2)制备肺组织匀浆,测定肺匀浆谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力;(3)使用荧光定量PCR法测定肺匀浆中SP-A、SP-B、SP-CmRNA基因表达水平。结果:1.光镜下肺组织病理学变化及肺损伤病理评分(IQA):与A组小鼠肺组织相比,B组肺损伤IQA无统计学差异(P﹥0.05);C、D、E、F组IQA显著升高(P﹤0.01)。C肺组织肺泡结构紊乱、破坏,肺间质增厚,肺泡水肿,部分肺泡透明膜形成,肺间质及肺泡内红细胞漏出并溶解,大量炎性细胞浸润。与C组相比较,D组肺组织损伤减轻,肺泡结构基本完整,但可见肺泡间隔增厚,炎性细胞浸润,肺损伤IQA下降差异明显(P﹤0.01)。E组肺损伤最重,肺泡塌陷及严重肺不张,广泛透明膜形成,大量红细胞漏出溶解及炎性细胞浸润,可见中性粒细胞大量聚集成团,巨噬细胞呈片状聚集,IQA显著升高(P﹤0.01)。与E组相比,F组肺损伤未见明显改善,IQA下降无统计学差异(P﹥0.05)。轻度蝮蛇毒致小鼠ALI腹腔注射还原型谷胱甘肽后其肺损伤病历评分明显降低。2.肺组织匀浆GSH-Px活力变化:与A组相比较,B组肺匀浆GSH-Px活力升高(P﹤0.01);而D、E、F组肺匀浆GSH-Px活力均显著升高(P﹤0.01);C组肺匀浆GSH-Px活力无明显差异(P﹥0.05)。与C组相比较,D组GSH-Px活力升高(P﹤0.05)。E组与F组两两比较差异无统计学意义(P﹥0.05)。小鼠注射GSH后GSH-Px活力著增强。3.肺组织匀浆SP-A、SP-B、SP-C mRNA表达水平变化:与空白对照A组相比较,B组小鼠肺组织中SP-A、SP-B、SP-C mRNA表达水平差异均无统计学意义(P﹥0.05);C、E组小鼠肺组织中SP-A、SP-B、SP-C mRNA表达水平均降低(P﹤0.05)。与低剂量蝮蛇毒素C组相比,高剂量蝮蛇毒素E组小鼠肺组织中SP-A、SP-B、SP-C mRNA表达水平均降低(P﹤0.05)。与C组相比,D组小鼠肺组织中SP-A、SP-B、SP-C mRNA表达水平显著升高(P﹤0.01)。与E组相比,F组小鼠肺组织中SP-A、SP-B mRNA表达水平显著升高(P﹤0.01),而SP-C mRNA表达水平升高无统计学差异(P﹥0.05)。蝮蛇毒致小鼠急性肺损伤肺组织SP-A、SP-B、SP-CmRNA表达水平均降低,且中毒越重,下降越明显。轻度蝮蛇毒致急性肺损伤小鼠腹腔注射还原型谷胱甘肽后肺组织中SP-A、SP-B、SP-CmRNA表达水平均增强。而重度蝮蛇毒致急性肺损伤小鼠注射还原型谷胱甘肽后其肺组织中仅SP-A、SP-BmRNA表达水平升高。结论:1.蝮蛇毒致小鼠急性肺损伤肺组织SP-A、SP-B、SP-CmRNA表达水平均降低,且中毒越重,下降越明显。2.轻度蝮蛇毒致急性肺损伤小鼠腹腔注射还原型谷胱甘肽能增强GSH-Px活力,降低肺组织病理评分,减轻肺损伤,增强肺组织中SP-A、SP-B、SP-CmRNA表达水平。3.重度蝮蛇毒致急性肺损伤小鼠肺组织中GSH-Px活力增强,注射还原型谷胱甘肽后其SP-A、SP-BmRNA表达水平升高,但不能减轻其肺损伤。