保定地区鸡“支气管阻塞”发病情况调查及病原分离鉴定

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鸡“支气管阻塞”是一种多病因呼吸道疾病,对养鸡业生产危害巨大。本研究对保定地区鸡“支气管阻塞”进行了发病情况调查、病原分离鉴定、分离病原对肉鸡的致病性,为该病的防控提供理论依据。  2016年1~6月,对保定地区鸡“支气管阻塞”进行发病情况调查。调查结果显示,该病多发于3~5月;不同品种和不同日龄的鸡均可发病,发病率高低不等,死亡率为10%~25%,病程为14~18d。本病的发生与养殖场的不良管理状况有关。  在保定地区采集20份典型“支气管阻塞”病例病料,共分离到5株传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)、2株H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)和2株铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)。对5株IBV分离毒的膜蛋白(Membrane Protein,M)基因核苷酸序列测定和遗传进化分析表明,5株IBVM基因的开放阅读框均由678bp组成,编码由225个氨基酸残基组成的多肽;DZ5、DZ8、DZ16、ZZ6、ZZ7株与LX4株IBV的亲缘关系最为密切,与CU-T2株IBV的亲缘关系最远。对2株H9亚型AIV分离毒的血凝素(hemagglutinin,HA)基因和神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)基因的部分核苷酸序列测定和遗传进化分析表明,2株H9亚型AIV HA基因部分序列长度均为554bp,编码184个氨基酸;其HA基因与2010年至2015年间的参考毒株亲缘关系较近,而与1998年至2009年间的毒株亲缘关系较远;2株H9亚型AIV NA基因部分序列长度均为374bp,编码124个氨基酸;其NA基因与2014~2016年间的H9亚型AIV亲缘关系比较近,与1994~2013年间的H9亚型AIV亲缘关系较远。对2株PA的16S rRNA部分序列测定和遗传进化分析表明,2株PA分离株16S rRNA序列均为435nt组成,分离菌株与PA参考菌株同源性最高,为98.6%~100%。  用分离的IBV、H9N2亚型AIV和PA接种3周龄肉鸡,以复制“支气管阻塞”模型。试验结果表明,单一病原接种鸡和两种病原联合接种鸡均表现出一定程度的呼吸道症状和病变,但均未复制出典型“支气管阻塞”病例,而3种病原联合接种鸡复制出了典型“支气管阻塞”病例。这表明肉鸡“支气管阻塞”是由多病原参与复杂的呼吸道疾病。病原分离、鉴定结果表明接种肉鸡的3种病原可经咽喉排毒。
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