金匮肾气丸合补中益气丸对自然衰老小鼠AMPKα表达的影响

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目的:检测金匮肾气丸合补中益气丸对老年小鼠运动能力、体重、不同部位体温、血糖的影响;检测金匮肾气丸合补中益气丸对老年小鼠内脏器官腺苷酸活化蛋白激酶(AMPKα)以及磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(P-AMPKα)蛋白表达的影响,初步探讨金匮肾气丸合补中益气丸对生物能量代谢关键分子的调节作用机制,为预防和治疗衰老所致的生理代谢功能下降及相关疾病提供理论和实验依据。方法:构建自然衰老小鼠模型(18~24月龄),随机分成正常对照组(Contorl)、金匮肾气丸组(JKSQ)、补中益气丸组(BZYQ)、金匮肾气丸合补中益气丸组(JKSQ&BZYQ),跟踪检测老年小鼠体重、不同部位体温和血糖,通过平衡杆试验、旷场试验、悬挂试验评估老年小鼠运动能力,检测金匮肾气丸合补中益气丸对老年小鼠的生理调控情况。通过蛋白免疫印迹(Western Blot,WB)和免疫荧光方法检测老年小鼠肝脏、胰腺、肾脏、脾脏、空肠、结肠中AMPKα、P-AMPKα蛋白表达,以分析可能的潜在作用机制。结果:1、体重数据显示,与给药前相比,Contorl及BZYQ老年小鼠给药后体重明显下降(P<0.05),而JKSQ&BZYQ体重变化不明显。2、体温数据显示,老年小鼠头部、颈部、胸部、腹部近心端体温较高,四肢和尾部体温较低,尤以左下肢和尾部体温最低,体温呈向心性分布;给药后,JKSQ&BZYQ老年小鼠体温升高,右上肢、左下肢及右下肢体温较Contorl明显升高(P<0.05);且JKSQ&BZYQ老年小鼠左下肢和右下肢体温较自身给药前相比亦明显升高(P<0.05)。3、空腹血糖数据显示,Contorl老年小鼠血糖水平比自身给药前明显升高(P<0.05)。给药后,JKSQ&BZYQ老年小鼠血糖水平较Contorl更接近正常值(P<0.05)。4、行为学数据显示,(1)平衡杆试验:与给药前相比,Contorl及BZYQ老年小鼠给药后平衡杆所用时间明显增加(P<0.05),而JKSQ&BZYQ所用时间减少,但无显著差异。(2)旷场试验:与给药前相比,Contorl、JKSQ及BZYQ老年小鼠给药后旷场运动距离减少,而JKSQ&BZYQ旷场运动距离增加,但均无显著差异。(3)悬挂试验:与给药前相比,Contorl老年小鼠给药后悬挂所用时间显著减少(P<0.01);给药后,JKSQ、BZYQ及JKSQ&BZYQ老年小鼠悬挂所用时间均比Contorl显著增加(P<0.001)。5、Western Blot结果显示,在老年小鼠肝脏、脾脏、肾脏、胰腺、结肠组织中,AMPKα、P-AMPKα蛋白均有表达,JKSQ&BZYQ老年小鼠AMPKα、P-AMPKα蛋白表达均比Contorl明显升高(P<0.05)。6、免疫荧光结果显示,JKSQ&BZYQ老年小鼠肝脏、脾脏、肾脏、胰腺、结肠中AMPKα、P-AMPKα蛋白表达均比Contorl明显增加(P<0.05)。结论:(1)金匮肾气丸与补中益气丸联用对老年小鼠体重、体温、血糖以及运动能力具有调节作用。(2)金匮肾气丸与补中益气丸联用提高老年小鼠组织中AMPKα活性,激活AMPK途径,改善衰老所致生理代谢功能的下降。
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