【摘 要】
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目的:本研究构建肝癌抗原肽-热休克蛋白复合物修饰树突状细胞(DC),观察这种修饰的DC细胞表型及其分泌细胞因子的变化,进一步观察其在体外的抗肿瘤作用。方法:从H22肝癌细胞中
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目的:本研究构建肝癌抗原肽-热休克蛋白复合物修饰树突状细胞(DC),观察这种修饰的DC细胞表型及其分泌细胞因子的变化,进一步观察其在体外的抗肿瘤作用。方法:从H22肝癌细胞中提取肿瘤抗原肽,并在体外与热休克蛋白70(Hsp70)进行结合;采用细胞培养技术,培养rmGM-CSF、rmIL-4诱导的小鼠骨髓细胞,体外获取大量的DC,用HSP-70抗原肽复合物刺激DC,取上清液,测细胞因子IL-10,IL-12含量,并用流式细胞仪分析DC表面分子。结果:DC体外诱导培养成功,HSP70-H22复合物可使DC成熟,DC表面分子CD40,CD80在HSP70-H22复合物修饰DC组表达较单纯DC组有显著性增高(P<0.01);10ug/ml, 20ug/ml组之间相比无显著性差异(P>0.05);三组之间CD11c无差异性(P>0.05)。Hsp70-H22抗原肽(10ug)修饰的DC组的细胞因子IL-12明显高于单纯DC组(P<0.01),Hsp70-H22抗原肽(20ug)修饰的DC组的细胞因子IL-12也明显高于单纯DC组(P<0.01),Hsp70-H22抗原肽(10ug)和Hsp70-H22抗原肽(20ug)相比具有显著性差异(P<0.01);Hsp70-H22抗原肽修饰的DC组上清中,IL-10的含量明显下降,以Hsp70-H22抗原肽修饰的DC组(20ug)上清中含量最少与单纯DC组相比有显著性差异(P<0.01),Hsp70-H22抗原肽修饰的DC组(10ug)与单纯DC组相比差异也有显著性(P<0.05)。结论:HSP70-H22复合物能提高DC表面分子CD40,CD80等表达,诱导DC的成熟,并能诱导DC分泌细胞因子IL-12明显增高,IL-10降低,达到抗肿瘤效应。
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