【摘 要】
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研究背景:在机体收到损伤时,皮肤的连续性被破坏,在伤口愈合过程中,由于纤维组织的过度修复,最终形成增生性瘢痕。其症状包括瘙痒、疼痛,当增生性瘢痕发生于关节部位时,会引起局部的功能障碍,严重影响生活质量。治疗增生性瘢痕的方法有很多,但目前仍然没有金标准。近年来,国内外有学者提出氧化应激可能与增生性瘢痕形成过程有关。研究显示,增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中存在着氧化还原失衡。有学者通过检测猪背部皮肤创面愈
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研究背景:在机体收到损伤时,皮肤的连续性被破坏,在伤口愈合过程中,由于纤维组织的过度修复,最终形成增生性瘢痕。其症状包括瘙痒、疼痛,当增生性瘢痕发生于关节部位时,会引起局部的功能障碍,严重影响生活质量。治疗增生性瘢痕的方法有很多,但目前仍然没有金标准。近年来,国内外有学者提出氧化应激可能与增生性瘢痕形成过程有关。研究显示,增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中存在着氧化还原失衡。有学者通过检测猪背部皮肤创面愈合不同时期的抗氧化蛋白含量,结果表明,增生性瘢痕在形成过程中确实存在着氧化还原的失衡。越来越多的证据表明,在难愈性创面的治疗中使用抗氧化剂可以促进创面愈合。但目前少见在增生性瘢痕的治疗中使用抗氧化剂。α-硫辛酸（ALA）是一种强效抗氧化剂,基于其出色的抗氧化作用,已被广泛用于临床中糖尿病的神经退行性病变、糖尿病足、器官纤维化等疾病的治疗。在此前的一项双盲研究中发现,α-硫辛酸可以减轻紫外线照射下造成的皮肤光老化症状。另一项研究表明,α-硫辛酸通过增加谷胱甘肽（GSH）循环减轻镉诱导的大鼠肝脏细胞氧化应激损伤。核因子红系相关因子-2（Nrf2）是一种关键的转录因子,可调节抗氧化基因的表达。国内有学者检测正常皮肤和增生性瘢痕细胞中Nrf2基因的表达,结果表明在增生性瘢痕中Nrf2基因表达增加。虽然α-硫辛酸在诸多疾病治疗过程中有明显的疗效,但α-硫辛酸在增生性瘢痕的预防和治疗过程中的效果仍未可知,其作用机制尚待确定。研究目的:本研究旨在探讨α-硫辛酸是否可抑制增生性瘢痕的进展,同时检测α-硫辛酸对增生性瘢痕中抗氧化产物及Nrf2-Keap1-ARE通路的影响,以期为抗氧化剂在增生性瘢痕的治疗中提供研究基础,评价α-硫辛酸的抑制作用。研究方法:选取18只新西兰大白兔,随机分为正常对照组（正常皮肤组）、模型对照组（HTS组）、实验组（4%ALA组）,连续用药28天后用HE、Masson染色及免疫组织化学染色评估瘢痕相关指标的变化和瘢痕组织内氧化应激相关指标的变化;蛋白免疫印迹法检测抗氧化通路相关蛋白的表达水平。研究结果:我们的研究结果表明,第7 d时,4%ALA组与模型组比较差异无统计学意义,第14 d与28 d时4%ALA组与模型组比较,温哥华瘢痕评分明显降低(F14 d=1.262,P＜0.001;F28 d=2.102,P＜0.001)。实验组较模型组瘢痕体积明显减小,瘢痕颜色明显变浅,硬度明显降低。模型组呈现HTS的典型表现。HE染色显示模型组真皮层明显增厚,乳头层和网状层边界模糊。高倍视野下真皮内成纤维细胞、微血管也明显增多。4%ALA治疗28 d的瘢痕,瘢痕真皮层明显变薄,细胞和微血管明显减少。Masson染色显示模型组组织切片中真皮深层胶原纤维致密,胶原纤维较宽,排列紊乱,呈结节状、圆形或螺旋状排列。相反,4%ALA组中胶原纤维细长,颜色浅蓝色,密度降低,平行于皮肤表面,有向正常皮肤组转化的趋势。模型组中CD34阳性表达的微血管数显著高于正常组及ALA组;Col I和ColⅢ主要表达于细胞外基质中,模型组中Col I和ColⅢ阳性面积明显多于正常组及4%ALA组;模型组中,Ki67阳性表达率明显多于正常组及4%ALA组。与4%ALA组及正常组相比,模型组中MDA、Hyp含量明显升高,GSH-px、GR活性均明显升高,GSH水平明显降低,T-SOD活性逐渐递增(FGR=79.36,FGSH=237.3,FGPX=164,FHYP=285.5,FMDA=320.2,FMDA=320.2,FT-SOD=99.25),差异有统计学意义。在正常组、模型组、4%ALA组中,NRF2、SOD1、NQO1、CAT、HO-1蛋白表达逐渐递增(F总NRF2=57.82,FHO-1=216.5,FNQO1=198.4,FCat=103.7,FSOD1=480,F核NRF2=90.04),组间两两比较差异有统计学意义（P＜0.05）。研究结论:从本次研究结果中我们得出结论,α-硫辛酸对增生性瘢痕有抑制作用,增加了谷胱甘肽循环,并增加了抗氧化蛋白的表达,促进Nrf2的核转位。本次实验结果为抗氧化剂治疗增生性瘢痕提供了新的见解和实验基础。
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