【摘 要】
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目的:(1)探讨Meis2、Smad4及Smad7蛋白在非小细胞肺癌(non small-cell l ung cancer,NSCLC)细胞中的表达情况;(2)初步探索Meis2在NSCLC细胞中参与TGF-β/Smad信号通路的作用机制。方法:(1)收集2012年2月至2019年2月在宜昌市第一人民医院住院手术切除并经病理确诊的石蜡包埋NSCLC及良性病变组织标本80例,除外合并其他部位恶性肿
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目的:(1)探讨Meis2、Smad4及Smad7蛋白在非小细胞肺癌(non small-cell l ung cancer,NSCLC)细胞中的表达情况;(2)初步探索Meis2在NSCLC细胞中参与TGF-β/Smad信号通路的作用机制。方法:(1)收集2012年2月至2019年2月在宜昌市第一人民医院住院手术切除并经病理确诊的石蜡包埋NSCLC及良性病变组织标本80例,除外合并其他部位恶性肿瘤及转移瘤。应用免疫组化方法检测病理组织中Meis2、Smad4及Smad7的蛋白表达水平;(2)通过慢病毒转染的方法将PLKO.1-Meis2-shRNA感染A549细胞,运用实时定量荧光聚合酶链锁反应(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)方法检测基因抑制效率;(3)RT-qPCR感染后A549细胞中TGF-β/Smad信号通路相关因子m RN A表达水平;(4)WB检测A549细胞中TGF-β/Smad信号通路相关蛋白的表达水平。结果:(1)Meis2蛋白在肺癌组织中阳性表达率较良性病变升高,Smad4蛋白在恶性肿瘤组织中表达较良性病变降低;Smad7蛋白在恶性肿瘤组织中表达较良性病变明显增高;且Meis2与Smad7表达呈正相关性;(2)将质粒p LKO.1-Meis2成功转染至293FT细胞,收集病毒液感染A549细胞,运用RT-qPCR检测Meis2 mRNA水平降低,W estern-Blot方法检测Meis2基因蛋白表达降低,提示转染成功;(3)RT-qPCR检测显示,实验组与对照组(Meis2-shRNA-GFP组)相比,Smad2、Smad3、Smad7的mRNA表达受到抑制,而TGF-β1、TGF-β2、Smad4的mRNA表达增强;(4)Western-Blot方法检测显示,实验组与对照组相比,Smad4蛋白表达增强1.4～1.8倍,Smad2、Smad3、S mad7的蛋白表达降低。结论:(1)Meis2基因参与了非小细胞肺癌的发生发展;(2)Meis2基因参与了NSCLC细胞中TGF-β介导的Smad信号通路。
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