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原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是最常见的恶性肿瘤之一,我国肝癌的死亡率居第二位,严重威胁着我国居民的健康。HCC的发生和发展是一个多因素、多阶段累积的复杂过程,比如病毒的感染,基因的异常表达,过量摄入酒精等,但具体的分子作用机制研究尚未明确。SOX家族基因作为Wnt/β-catenin信号通路负性调控因子,其异常表达导致Wnt/β-catenin信号通路被异常激活与许多人类肿瘤的发生发展相关,包括胶质瘤、结肠癌、肝癌等。目的构建HCC中SOX基因rnRNA表达谱,分析其相关性及其与临床病理相关因素的关系,研究SOX基因异常表达及临床病理因素在HCC发生发展中发挥的作用。材料与方法1.肝癌细胞系及组织样本7株肝癌细胞系包括Huh-7、PU-PRL-5、Sun-449、SMMC-7721、HepG2、HBx-F344、SK-Hep1。采集40例HCC患者手术后癌组织及其配对癌旁组织,7例正常肝组织,并收集其临床病理相关资料。采集标本和收集资料前征得患者的知情同意。2.肝癌细胞系及组织中SOX基因mRNA表达水平的测定应用荧光定量PCR方法测定肝癌细胞系、正常肝组织、HCC癌组织及配对癌旁组织中SOX基因mRNA表达水平,以HMBS作为内参基因。3.数据分析应用SPSS12.0统计软件对数据进行分析,对肝癌细胞系和正常肝组织中SOX基因mRNA表达量进行配对t检验,对HCC癌组织和配对癌旁组织SOX基因mRNA表达量进行Wilcoxon符号秩和检验,以此描述肝癌细胞系和组织中SOX基因mRNA表达的差异。对HCC癌组织和配对癌旁组织中SOX基因mRNA表达量进行Spearman秩相关分析,以此描述SOX基因之间mRNA表达水平的相关性。对HCC癌组织中SOX基因mRNA表达水平与临床病理进行Fisher确切概率法检验,以此描述SOX基因mRNA表达水平与临床病理关联性。以a=0.05作为检验水准。结果1.SOX基因在肝癌细胞系中的mRNA表达水平SOX2,SOX5,SOX6,SOX7和SOX17在7例肝癌细胞系中mRNA表达量均低于其在7例正常肝组织中mRNA平均表达量,且其在7例肝癌细胞系和7例正常肝组织中的mRNA表达差异具有统计学意义(t=2.753,P=0.033；t=3.150,P=0.035；t=3.160,P=0.020；t=2.826,P=0.030；t=2.827,P=0.030).2.SOX基因在HCC癌组织及配对癌旁组织中的mRNA表达水平在40例HCC癌组织中,SOX5的低表达率为40%,SOX2和SOX7的低表达率达47.5%,而SOX6的低表达率高达55%,且其在40例HCC癌组织和配对癌旁组织中的mRNA表达差异具有统计学意义(z=-2.755,P=0.006；x=-1.978,P=0.048；z=-1.978,P=0.048；z=-2.298,P=0.022)；而SOX4 mRNA在18(45%)例中的表达上调,且与40例配对癌旁组织中的表达差异具有统计学意义(z=-2.097,P=0.036).3.SOX基因的相互作用关系SOX9与SOX4.SOX13与SOX5.SOX7与SOX17在HCC发生前后都存在显著相关性。而SOX17与SOX4/SOX/3、SOX7与SOX4/SOX6/SOX9/SOX13、SOX2与SOX4.SOX6与同亚族基因SOX5/SOX13间的相关性随HCC发生及进展消失。4.SOX基因mRNA表达水平与临床及病理相关因素的相关关系不同临床分期的患者中SOX2、SOX7和SOX9的mRNA表达差异具有统计学意义(X2=7.087,P=0.028；X2=8.319,P=0.013；X2=5.868,P=0.046)；不同肝硬化程度的患者中SOX2和SOX9 mRNA表达差异具有统计学意义(X2=9.035,P=0.009；X2=7.203,P=0.021).有无门静脉癌栓的患者中SOX5的mRNA表达差异具有统计学意义(X2=7.968,P=0.017)；肝内有播散和肝内无播散的患者中SOX9的mRNA表达差异具有统计学意义(X2=7.286,P=0.025).结论1.HCC中SOX家族基因mRNA表达异常,它们可能通过异常激活Wnt/β-catenin信号通路促进HCC的发生及发展。2.SOX家族基因之间可能通过复杂的相互作用模式在HCC发生及发展的过程中发挥重要作用。3.SOX家族基因的异常表达可能与HCC的临床分期、肝硬化程度、门静脉癌栓的有无、肝内是否播散等有关。