鹌鹑球虫病是鹌鹑的一种常见病,给鹌鹑养殖业造成了巨大损失。为掌握目前河南省鹌鹁球虫病的流行动态及种类分布,笔者于2006年3月～2006年9月对河南省鹌鹁养殖场球虫感染情况及其种类进行了调查。结果显示:各地区球虫感染率均很高,总感染率达89.0%;18日龄以下鹌鹑球虫感染率低,为5.8%;20～38日龄仔鹑和50日龄以上成鹑球虫感染率高,分别达92.5%和93.0%。本次调查鉴定出3种艾美耳属球虫,即巴氏艾美耳球虫(Eimeria bateri)、角田氏艾美耳球虫(E.tsunodai)和日本鹌鹑艾美耳球虫(E.uzura),其中E.bateri为优势虫种。不同日龄、不同养殖场鹌鹑球虫感染强度存在差异,但整体感染强度不高。应用单卵囊分离技术获取E.uzura。单卵囊感染6日龄雏鹑8只,分别收集纯种卵囊,并进行两次单卵囊后代扩增,同时对扩增时的排卵囊规律、卵囊孢子化过程、卵囊形态结构、寄生部位等进行了研究。结果表明:单卵囊后代扩增所获得的球虫卵囊,与亲本和文献报道的E.uzura生物学特性相一致;25～26℃条件下,卵囊最早孢子化时间为14h,孢子化16h后孢子化率达到80%以上;两次单卵囊后代扩增的排卵囊高峰期存在较大差异,而潜隐期和显露期基本一致;本实验所分离的E.uzura虫株对鹌鹑的致病力不强。将200只8日龄公鹌鹑随机分成五组,除空白对照组外,其他四组每组每只分别经口感染1.0×10~3个、1.0×10~4个、1.0×10~5个、5.0×10~5个孢子化E.uzura卵囊,对E:uzura的致病性、排卵囊规律和内生发育进行研究。结果表明:刚分离的E.uzura感染鹌鹑后,鹌鹑表现出增重下降、血便等临床症状,死亡率不高,仅1.0×10~5个卵囊感染剂量组出现6.67%的死亡率;排卵囊潜隐期为5d,显露期大于8d,高峰期在感染后5～6d(day post inoculation 5～6,DPI 5～6)和DPl8～9;组织切片观察发现E.uzura主要寄生于鹌鹑十二指肠的绒毛上皮细胞,空肠前段亦有虫体寄生:实验中观察到四代裂殖生殖阶段和一个配子生殖阶段;从成熟裂殖体形状及裂殖体中所含裂殖子数量多少分析,可能存在两种类型的裂殖体。第一代成熟裂殖体出现于感染后12h,形状不规则,平均大小为4.8μm×3.8μm,含3～5个呈新月形的裂殖子,裂殖子平均大小为4.5μm×1.2μm;第二代裂殖体出现于感染后60h,产生5～9个平均大小为2.0μm×1.0μm的裂殖子;感染后90h产生第三代裂殖体,数量明显增多,呈长椭圆形或圆形,平均大小为5.0μm×4.2μm,每个裂殖体含数十个香蕉形裂殖子,平均大小为1.5μm×0.8μm;感染后96h可看到含较多裂殖子的第四代裂殖体,平均大小为7.0μm×5.2μm,感染后102h产生第四代裂殖子,平均大小为2.8μm×1.4μm。感染后108～120h可观察到各种处于不同发育时期的配子体。大配子体大小为7.7～18.1μm×5.2～12.9μm,平均12.3μm×9.0μm;小配子体大小为2.6～7.7μm×2.6～7.2μm,平均5.3μm×4.7μm。感染后114～120h,肠内容物和肠道上皮细胞中可观察到卵囊。感染后6～84h,引起的肠道病变比较轻微,不易观察。随着虫体的进一步发育及虫体数量的增多,感染后96h出现较为明显的病变。病变主要表现为十二指肠及空肠前段肠绒毛上皮细胞发生轻微颗粒变性、坏死,固有层有大量炎性细胞浸润,肠道局部有轻微出血和充血现象。感染后102～120h,即便是感染剂量为1.0×10~3个卵囊的低剂量组,在一些宿主上皮细胞中也可观察到多个虫体,但各组肠绒毛萎缩现象不明显。用巢式PCR对分离得到的E.uzura 18SrDNA进行扩增、测序,得到了一条目标序列。经BLAST搜索,ClustalX1.81比对,Phylip3.64软件构建系统进化树,发现所构建的简约树和邻接树拓扑结构仅有微小差别,两种方法绘制的系统进化树均反映出E.uzura为一独立种。