拟南芥心皮发育基因MS1522的功能分析及雄性不育突变体ems1227的基因定位

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花是被子植物的生殖器官,由茎顶端分生组织中的细胞分化而来。双子叶模式植物拟南芥的花呈辐射对称,由外到内包含萼片、花瓣、雄蕊和心皮共四轮花器官。雌蕊由两个心皮融合而成,它是授粉和孕育种子的场所,因此心皮发育是植物生殖生物学研究领域的热点。在本文中,我们鉴定并分析了一个拟南芥多心皮突变体ms1522。遗传学分析表明,该突变体的茎端分生组织增大,心皮等花器官增多的表型是由单基因控制的隐性性状。利用图位克隆的方法对ms1522进行了基因定位,最终将突变基因定位在第1条染色体上的分子标记F10A5和T4O12之间164kb的区间内。生物信息学分析表明,该区间内包括一个已报道的编码受体激酶的CLV1(CLAVATA1)基因,该基因突变体的表型与ms1522相似,通过基因测序及等位分析实验,证明ms1522是clv1的等位突变体。测序结果表明ms1522突变体中CLV1基因编码区的2516bp处发生了点突变,导致CLV1蛋白中的Ala839(GCT)突变为Val839(GTT)。蛋白序列比对表明:Ala839对于CLV1蛋白的受体丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶功能十分重要。通过树脂切片、扫描与透射电镜等技术研究了ms1522的心皮发育过程,发现该突变体雌蕊中的假隔膜不能完全融合;此外通过构建ms1522与ufo的双突变体,发现双突变植株雌蕊的花柱与柱头显著增大,花粉管通道与维管束分布发生改变,说明CLV1与UFO这两个基因可能具有共同维持雌蕊正常发育的作用。本研究将有助于进一步阐明ms1522突变基因的功能,同时也将为阐明拟南芥雌蕊发育的分子机制提供重要的线索。
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