茶树AUX/IAA转录因子GsIAA4的功能研究

来源 :安徽农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shanon0577
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本实验室前期研究发现一条R2R3-MYB转录因子CsMYB1的转基因烟草具有植株矮小、侧根较少、生长缓慢的性状。在CsMYB1的酵母双杂交库中,筛到了一条茶树AUX/IAA家族转录因子,命名为CsIAA4。AUX/IAA家族转录因子是生长素信号转导途径中的负调控因子。本论文对CsIAA4进行功能分析,并研究了 CsIAA4与CsMYB1的互作,主要结果如下:1.茶树组织特异性显示CsIAA4在叶、茎、根中都有表达,在老根、侧根、根尖表达量较高。2.将CsIAA4转入烟草中,发现转基因烟草与野生型烟草G28相比,表现出了一系列生长素缺失的症状,如植株矮小、叶片较小、侧根减少。外源激素处理转基因烟草并测量其根长、侧根数量等指标,发现CsIAA4植株对生长素的敏感性降低。3.CsIAA4和C.sMYB1在舒茶早基因组组织器官表达量具有一致的趋势、而且二者都定位在细胞核,过表达烟草都表现出侧根减少,主根伸长受抑制的性状,MBP Pull-Down、BIFC等实验表明CsIAA4与CsMYB1能进行蛋白互作。4.生物信息学分析,CsIAA4有4个功能域,为进一步研究两者互作的位点,本论文将介导CsIAA4泛素化的Domain Ⅱ截断后再进行与CsMYB1的蛋白互作实验,结果显示CsIAA4D2不能与CsMYB1互作。CsIAA4能抑制生长素信号转导、抑制茶树侧根的发生及根系生长,这种抑制随着CsIAA4的降解而消失,但是CsMYB1通过与CsIAA4互作,增加了后者的稳定性,使其在植物体内积累,抑制根系的生长素响应。
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