细胞体外培养是使细胞在人工模拟的生理环境中生长繁殖的一种体外培养方式,是进行生物工程研究的一项重要技术。培养的细胞可以用来分离纯化病毒、生产疫苗和药物。离体细胞培养的成功为细胞结构与功能的研究创造了条件,包括各种细胞株的建立。这些培养的细胞已成为细胞生物学、免疫学等学科研究的重要途径。细胞体外培养需要满足一些基本条件:1.无菌无毒的培养环境;2.适宜的培养温度;3.合适的气体环境和pH;4.充足的营养,包括多种氨基酸、维生素、辅酶、核酸、嘌呤、嘧啶、生长因子。猪睾丸细胞(ST细胞)在猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等的繁殖和猪瘟疫苗的生产中广泛应用,是病毒繁殖、疫苗生产的重要细胞系之一。本研究对ST细胞的规模化培养工艺进行了研究,通过比较不同血清浓度(5%、10%、15%)、不同培养温度(35℃、36℃、37℃)和不同pH值(7.2、7.3、7.4)对ST细胞体外规模化培养的影响,并通过细胞计数法,分别绘制了ST细胞在不同血清浓度、不同培养温度、不同pH值条件下培养的生长曲线图,从而筛选出一个最适合ST细胞规模化体外培养的工艺。结果表明,培养液中含10%的血清浓度在三种血清浓度中为最适合、最经济的浓度;三种不同温度、pH值培养环境对ST细胞体外培养影响不大。合适的血清浓度既可以满足细胞生长的需求,又能避免较高血清浓度所导致的营养过剩,从而对细胞产生毒害作用。本研究的结果为ST细胞规模化体外培养所需的血清浓度、温度、pH值提供了一个适宜的参考值,对提高利用猪睾丸细胞生产猪瘟弱毒疫苗的生产工艺具有积极的意义。