骨形态发生蛋白15(BMP-15)属于TGF-β超家族成员，对卵泡的生长发育和雌性生殖功能起重要的调节作用。本研究基于其它哺乳动物BMP-15基因的研究基础上，首先采用RT-PCR技术克隆了牛BMP-15部分cDNA序列，然后利用原位杂交技术在mRNA水平上检测了BMP-15基因在牛卵巢内的表达情况。 方法：1、在Genbank中查找羊和小鼠的BMP-15基因序列，运用DNAStar软件对这些序列进行同源性分析，依据同源性较高的外显子区域设计引物。从牛卵巢中提取总RNA，采用RT-PCR技术扩增出牛BMP-15部分cDNA序列，将此片段克隆到pGM-T载体中，提取重组质粒，经酶切和PCR鉴定后进行序列测定。2、用T7、SP6引物对重组质粒进行PCR扩增后，经体外转录合成地高辛标记的cRNA探针，利用这一探针与牛卵巢组织进行原位杂交，观察BMP-15mRNA在牛卵巢内的表达情况。 结果：目的DNA测序后获得长为423bp的序列，与其他物种BMP-15基因相应的核苷酸序列同源比对，发现与山羊、绵羊、猪、狗、人、小鼠和大鼠BMP-15相应区段的同源性分别为98％，97％、90％、89％、85％、78％和77％，证实所克隆的序列为牛BMP-15序列。原位杂交结果显示，BMP-15 mRNA在牛卵巢中有表达，且表达部位因卵泡所处发育阶段不同而不同：在初级卵泡和次级卵泡早期，牛BMP-15 mRNA主要在卵泡的颗粒细胞中有杂交信号，在次级卵泡晚期，BMP-15只在卵泡的透明带中有杂交信号。