京尼平(genipin)是栀子的果实京尼平苷的苷元,是一种环烯醚萜类的化合物,同时也是栀子苷在人体的肠内代谢产物和体内发挥药效作用的主要形式。据文献记载,京尼平具有多种药用价值如抗菌、抗肿瘤、抗炎、糖尿病治疗、保肝、营养神经等。京尼平还能通过调节肠道微生物的能量代谢与糖代谢对抗抑郁也有显著疗效。同时,京尼平作为一种具有高生物相容性和低细胞毒性的新型交联剂也被广泛地应用到天然生物材料中。然而,由于京尼平水溶性差,低溶出速率的缺点使其在口服生物利用方面受到限制。这些缺点成了京尼平广泛应用于药物制剂中的主要障碍。本实验主要研究了一种乳化溶剂挥发法制备京尼平纳米粉的制备工艺。药物纳米化后,可以增加药物粒子的比表面积,从而促进药物的溶解,改善药物的水溶性,达到提高药物在人体内的生物利用度的目的。在乳化溶剂挥发法的制备工艺优化设计中,粒径的大小是选择最优条件的标准,本文主要研究了表面活性剂的浓度、水相与有机相的体积比、匀浆转速与匀浆时间、高压均质压力与均质次数、京尼平与冻干保护剂的质量比对粒径大小的影响。以粒径大小为参照标准,经过一系列单因素实验的筛选后得到了制备京尼平纳米粉的最优条件。对在最优条件下得到的京尼平纳米粉进行了粒径和形貌的检测,并对得到的京尼平纳米粉进行了模拟胃液的溶出度测定以及大鼠体内生物利用度的研究。研究成果如下：1、通过单因素实验对乳化溶剂挥发法制备的京尼平纳米粉工艺进行了优化,最佳制备条件为：选用泊洛沙姆188作为表面活性剂,用量为5‰；京尼平原粉在氯仿和乙醇(7：3)混合溶剂中的浓度为180mg/ml;水相与有机相的体积比为10：1；匀浆速度为10000rpm,时间为1min,在此条件下的得到的京尼平乳剂的粒径为288.6nm。对该乳剂进行高压均质,高压均质压力为600bar,循环次数为9,此时得到的京尼平纳米乳为6.1nm。2、京尼平纳米粉的水溶液(不含甘露醇)复溶后的粒径大小为279.9nm。选用苷露醇作为冻干保护剂,加入的冻干保护剂的量与药物的质量比为1：1。京尼平冻干纳米粉复溶后的粒径为59.8nm。3、对在最优条件下得到的京尼平纳米粉(不含苷露醇)及京尼平纳米粉进行理化表征,包括SEM、FTIR、XRD、DSC。由电子扫描电镜的图像可见制备后京尼平的形貌发生显著变化,京尼平原药为粒径20-500μm范围的长方体状晶体,京尼平纳米粉呈近球形状,平均粒径为59.8nm,粒径明显减小并且粒径分布均匀。对红外吸收光谱分析研究可知,京尼平原药和纳米粉的图谱基本一致,表明其化学结构未发生变化。XRD结果分析表明原料药的晶体结构为结晶形,乳化溶剂挥发法制备的颗粒结晶度显著降低,典型的峰都减弱或者消失,这个事实表明京尼平粒子在经过乳化溶剂挥发法之后,具有小的粒子尺寸和较小的结晶度。最优条件下的京尼平粒子的熔点降低了5.8℃,这个证据表明了纳米化的京尼平有很低的结晶度,这个结果和X-射线衍图谱的结果是-致的。京尼平纳米粉的纯度比原药提高了,京尼平原药的外貌是浅黄色针状结晶态,制备后的纳米粉的外貌从浅黄色针状结晶变为了白色絮状。4、溶剂残留实验：根据回归方程计算,京尼平纳米粉的乙醇溶剂残留是538.1ppm(0.05381%),ICH限制的三类溶剂残留是5000ppm或0.5%,因而其残留符合ICH规定三类溶剂的要求,可安全使用；根据回归方程计算,京尼平纳米粉的氯仿溶剂残留是0.003883%。ICH限制的二类溶剂残留量是60ppm或0.006%,氯仿的溶剂残留量低于ICH限制的二类溶剂残留,所以京尼平纳米粉的氯仿残留量亦适合药品使用。5、采用模拟人体胃肠道环境的方式进行京尼平原粉、京尼平纳米粉(无甘露醇)和京尼平纳米粉的体外溶出实验,结果显示：经检测发现平均粒径为59.8nm的京尼平纳米粉的最大的溶解度大约是39.73mg/mL,京尼平纳米粉(无甘露醇)的最大溶解度为15.90mg/ml,而京尼平原粉的最大溶解度仅是4.39mg/mL;在溶出度实验开始阶段,19.1%京尼平原粉,90.6%京尼平纳米粉(无甘露醇)和93.4%京尼平纳米粉分别溶解于溶出介质中。在2min之后,京尼平纳米粉(无甘露醇)达到了92.6%的药物溶解率,京尼平纳米粉达到了97.2%的药物溶解率。相比之下在2min内京尼平原粉只溶解了56.1%,并且京尼平原粉在60min后才达到最大溶解度。因此,京尼平纳米粉(无苷露醇)和京尼平纳米粉的溶解速率分别是京尼平原粉的1.65倍和1.73倍。与京尼平原药对比,纳米粉显示出了更快的溶出速率和溶解度。京尼平纳米粉的最大溶解度是京尼平原粉的9.05倍。6、在大鼠体内进行药物生物利用度的研究,采用高效液相色谱法检测大鼠血浆中京尼平的含量,通过对京尼平原粉和纳米粉血药浓度的分析,并进行AUC计算。结果显示京尼平纳米粉较原粉的生物利用度提高了799%。以上实验结果表明,采用乳化溶剂挥发法制备的京尼平纳米粉的粒径分布均匀,形状规则。检测结果表明京尼平纳米粉的化学结构没有任何变化,而结晶度降低了,明显改善了京尼平原粉水溶性差的特性,从而提高了其生物利用度。