珠子参热转化(加工炮制)机制研究

来源 :陕西中医学院 陕西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Nibel
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本论文以珠子参皂苷成分为研究对象,对其进行以下几个方面研究。   首先,在前期实验研究的基础上,发现加热对珠子参皂苷成分有影响,为此,采用化学水解、色谱技术对珠子参的主要活性部位一总皂苷进行化学成分分离,除人参皂苷Ro、竹节参皂苷Ⅳa外,从中又得到姜状三七苷R1、去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa两个主要皂苷成分,并按化学对照品的技术要求对其进行制备研究。   在此基础上,为全面、准确分析珠子参热转化(加工炮制)过程中成分变化规律建立了HPLC同时测定4种成分分析方法。结果发现人参皂苷R0、竹节参皂苷Ⅳa的含量随时间的增加逐渐降低,而姜状三七苷R1、去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa的含量随时间的增加逐渐升高。提示,热处理会引起珠子参化学成分的转化,推测在珠子参总皂苷的制备过程中经过提取.浓缩热处理会使姜状三七苷R1和去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa的含量升高。   第三,皂苷化学转化机制研究:实验结果发现在酸水解条件下,珠子参总皂苷水解产物以姜状三七苷R1和去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa为主要化学成分。同时,还通过对照品酸水解实验推测,姜状三七苷R1和去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa可能是人参皂苷R0和竹节参皂苷Ⅳa在酸水解的条件下去掉28位葡萄糖的产物。   最后,抗肿瘤作用和机制研究:采用体外实验MTT法,检测不同浓度珠子参总皂苷及去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa对人源HepG2肝癌细胞、人源HT-29结肠癌细胞和人源ECV-304血管内皮细胞体外增殖的抑制情况。其次,还采用流式细胞术和Western-blot技术探索珠子参皂苷对HepG2细胞凋亡和周期,以及蛋白质表达的影响。结果发现,珠子参总皂苷及去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa对上述3种细胞均有显著抑制作用,提示去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa可能是珠子参总皂苷中发挥抗肿瘤作用的主要化学成分。然而,珠子参经过合理、科学的热处理(炮制)可以提高抗肿瘤活性成分(去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa)含量,从而增强了珠子参及珠子参总皂苷的抗肿瘤活性。
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