莱茵衣藻是一种研究起步较早的单细胞藻类模式生物,它的细胞一侧有两条等长的纤毛,所需生长条件简单,极易培养。纤毛是一种的位于细胞膜表面的保守突起结构,参与调控细胞多种生命活动,纤毛内部存在一种从基体到顶部蛋白双向运输机制,IFT复合体和BBSome蛋白复合物都是这一运输机制的重要构成部分。BBS5是BBSome蛋白复合物的一个重要蛋白组分,其作用是调控信号转导、对某些功能蛋白降解起调控作用。BBS5缺陷会导致Bardet-Biedl综合症。本实验使用Trizol法提取莱茵衣藻CC-125RNA后反转录获得相应的cDNA,以此为模板,设计引物并经行PCR扩增反应,可获长度1059 bp的目的基因,将其连接到大肠杆菌Escherichia.coli XL1感受态细胞表达载体上,成功构建了分别带有6×His标签和MBP标签的重组质粒pET-28a(+)-bbs5和pMAL-C2X-bbs5,再将质粒转入Escherichia.coli BL21感受态细胞中,加入IPTG诱导摸索实验条件进行融合蛋白的表达,表达的蛋白经过纯化后,收集纯度在90%以上的抗原以免疫新西兰大白兔,每次免疫后采集血清进行效价的测定,三免后间接ELISA法测定效价为102400,收集抗血清并过经protein A纯化和抗原抗体纯化,最后采用Western blotting检测其对莱茵衣藻BBS5具有较高特异性。本实验实现了莱茵衣藻bbs5基因的原核表达,制备了一支特异性较高的BBS5多克隆抗体,为后续纤毛病与人类健康等相关研究奠定了基础。