利用氨基酸废液生产绿色木霉TV41固体菌剂的条件优化及其应用

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木霉是一类重要的腐生真菌,对环境温度和pH适应性强,生长和繁殖速度快,具有较高的生态竞争力因此,在多个国家被登记为生物杀虫剂、杀菌剂、微生物肥料、生物强化剂和自然抗性稳定剂等产品的核心菌株,在农业生产上广泛应用,对作物具有较好的促生、抗病、抗逆和增产效果,具有巨大的开发潜力和市场空间。固体培养是大部分木霉菌剂生产的主要方式,但目前固体培养基的杀菌消毒成本较高且操作复杂,制约了木霉菌剂的规模化固体生产,因此开展绿色木霉TV41固体菌剂生产条件优化有重要的生产实际意义。利用氨基酸生产企业产生的大量的强酸性氨基酸废液对绿色木霉TV41固体培养基进行杀菌消毒,并在氨基酸废液的加入量和放置时间、种子液和接种量、培养方式等方面对绿色木霉TV41固体培养条件进行优化;最后开展了木霉菌剂TV41对盐胁迫下番茄幼苗生长效果研究。首先研究了在三角瓶培养条件下,不同氨基酸废液添加量和放置时间对绿色木霉TV41固体发酵的影响。结果表明:在每10 g麸皮与水稻秸秆中(6:4),最佳氨基酸废液添加量为5 mL,最佳放置时间为Oh,在此条件下,绿色木霉TV41产孢量达到2.41 × 1 09 cfu/g。该氨基酸废液添加量和放置时间用于以下实验研究。然后,研究了不同的种子液、不同的接种量和培养容器对绿色木霉TV41固体发酵产孢的影响。结果表明,接入绿色木霉TV41菌丝作为种子液,进行固体发酵产孢效果最好。在接种量为10%时,绿色木霉TV41固体发酵产孢量最大。三角瓶培养条件下,木霉TV41的产孢量大于浅盘培养的产孢量,最大值为2.49×109cfu/g。进一步探究了在浅盘培养条件下,三种不同的培养基厚度对绿色木霉菌TV41固体发酵产孢的影响。结果表明,培养基厚度为0.5 cm时,其产孢量最大,其次是在生产绿色木霉TV41菌剂过程中,固体培养基厚度对绿色木霉TV41菌剂产孢量作用大。在加入氨基酸废液的绿色木霉TV41固体培养物中厚度应控制在0.5cm~1.0cm厚度范围内。在盆栽条件下,研究了绿色木霉TV41固体菌剂对盐胁迫下番茄幼苗生长的作用效果,结果表明:.在土壤各个盐浓度下,施用菌剂的植株的株高、根长、茎粗、地上部、地下部的鲜重与未施用组相比均得到了显著的提高;在土壤盐浓度低于0.4%时,施用绿色木霉TV41菌剂对于盐害作用影响不显著。在土壤盐浓度高于0.4%时,施用绿色木霉TV41菌剂处理组显著缓解番茄的盐害,促进作物生长;在一定盐浓度土壤中绿色木霉TV41能够有效改善植物生长状况,且在高浓度盐胁迫下,对植物生长量的提高更为显著。
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