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鱼类养殖是我国部分天然水体的主要用途之一,但是亚硝酸盐和氨氮作为水环境中常见的污染物成分可对水生生物造成负面影响。暗纹东方鲀(Takifuguobscurus)是具有较高经济价值的水产养殖品种,关于亚硝酸盐和氨氮等水质因素对暗纹东方鲀的影响尚不明确,因此,研究其免疫相关生理生化和基因表达的影响具有重要理论指导意义。 本文以暗纹东方鲀(30.06±5g)为研究对象,探究了亚硝酸盐对暗纹东方鲀24、48、72和96 h半致死浓度LC50分别为202、157.3、149.4和142.6mg/L,并计算得到其安全浓度为14.26mg/L。结合此研究结果及大量文献报道,本文进一步从组织、细胞和分子水平上探究了暗纹东方鲀在亚硝酸盐和氨氮浓度为50、100和200 mg/L质量浓度的水体胁迫环境下,其6、12、24和48 h时的免疫相关生理生化指标及基因表达的影响,结果表明氨氮和亚硝酸盐胁迫初期(6 h)可以诱导肝脏中SOD(超氧化物歧化酶)、CAT(过氧化氢酶)、HSP70(热应激蛋白70)、GR(谷胱甘肽还原酶)基因的大量表达,并出现峰值,其中SOD和GR表达量最大,且与细胞水平的酶活性变化规律基本一致。低浓度(50和100mg/L)的亚硝酸盐和氨氮可以使血液中NO含量、GLU(血糖浓度)和BUN(尿素氮)含量等指标的升高,使肝脏和肌肉SOD、CAT、GOT(谷草转氨酶)、POD(过氧化物酶)等酶活性的增强,高浓度对其活性有抑制作用,说明高浓度(200 mg/L)的氨氮和亚硝酸盐对暗纹东方鲀代谢和抗氧化酶系统造成了障碍。随着亚硝酸盐和氨氮浓度的升高和暴露时间的延长,血液中GOT和GPT(谷丙转氨酶)含量均有升高,而肝脏和肌肉中GOT、GPT活性稍有降低但变化不显著,这说明亚硝酸盐和氨氮的胁迫都对暗纹东方鲀肝脏造成了损伤。肝组织切片表明了氨氮和亚硝酸盐均造成肝窦隙扩张,细胞界限逐渐模糊,细胞空泡化,细胞坏死等情况,进一步证实肝脏组织出现了不同程度的损伤结果。SOD、CAT、POD等组成的抗氧化酶系统活性在肝脏组织中最大,血液中次之,肌肉中最小,表明了肝脏是暗纹东方鲀对抗亚硝酸盐和氨氮胁迫的主要代谢和非特异性免疫的场所。