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本论文通过体外细胞培养实验,探讨了博落回生物碱对肠上皮细胞IPEC-1增殖作用及胃泌素表达的影响。首先,博落回生物碱对肠上皮细胞增殖试验旨在研究博落回中血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱和别隐品碱在不同浓度、不同时间段对猪肠上皮细胞(IPEC-1)增殖的影响。IPEC-1预培养24h后,在培养基中分别加入不同浓度(4、2、1、0.5、0.25、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625μg/mL的血根碱或白屈菜红碱；100、50、25、12.5、6.25、3.125、1.5625μg/mL的原阿片碱或别隐品碱,各组不同浓度梯度均设8个重复)的博落回生物碱处理12或24h,4-甲基偶氮唑盐(MTT)染色法检测细胞增殖。结果表明：0.25～4μg/mL的血根碱、0.25～4μg/mL的白屈菜红碱、100μg/mL的原阿片碱或别隐品碱对IPEC-1细胞的生长有显著的抑制作用(P<0.05)；而0.00625～0.1μg/mL的血根碱、0.00625～0.1μg/mL的白屈菜红碱、3.125～25μg/mL的原阿片碱或1.5625～25μg/mL的别隐品碱对IPEC-1增殖具有明显的促进作用(P<0.05),随着博落回生物碱浓度的不断下降,这种促进作用又缓慢减弱；此外,延长博落回生物碱处理时间至24h,发现仅0.1μg/mL的白屈菜红碱、25μg/mL的原阿片碱和25μg/mL的别隐品碱对IPEC-1增殖具有显著促进作用(P<0.05),其余各组与对照组相比均无显著性差异(P<0.05)。由此可见,博落回生物碱在一定浓度范围可促进IPEC-1的增殖。这说明博落回生物碱提高动物生长性能可能是通过促进小肠细胞增殖分化更新,从而增强小肠消化、吸收、免疫屏障和应激反应等功能的途径实现的。其次,博落回对胃泌素及其受体表达影响的试验旨在研究博落回中血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱和别隐品碱对正常IPEC-1、人肝癌HepG2的增殖影响,并探讨胃泌素及其受体表达与细胞增殖和凋亡之间的关系。IPEC-1和HepG2细胞用不同浓度梯度的胃泌素(10-5～0-10mol/L)处理12h后,采用MTT染色法检测细胞增殖情况。结果表明,10-7～10-10mol/L胃泌素对两种细胞增殖都具有显著的促进作用(P<0.05),而经高浓度10-5～10-6nol/L胃泌素处理的两种细胞与对照组相比均无显著性差异(P>0.05)。通过回收细胞及上清液,用ELISA法检测经血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱和别隐品碱处理的IPEC-1和HepG2细胞中胃泌素及其受体的表达水平。结果显示：以上博落回生物碱经处理后的IPEC-1细胞中胃泌素及其受体的表达有显著的上升(P<0.05),而对HepG2细胞中胃泌素无显著性(P>0.05),但对其受体的表达表现出显著的抑制作用(P<0.05)。然后,进一步用Western Blotting法检测了各博落回生物碱(血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱和别隐品碱)处理HepG2细胞后,其胃泌素及其受体表达水平的影响。结果显示：随着血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱或别隐品碱的浓度上升,HepG2细胞中胃泌素及其受体的表达呈显著的抑制增强趋势(P<0.05),这与ELISA法结果一致。说明博落回生物碱可能具有通过对胃泌素的调节作用促进胃肠道正常上皮细胞增殖并能抑制肿瘤细胞生长的效果。