论文部分内容阅读
目的：通过观察白介素-17（interleukin-17，IL-17）、白介素-21（interleukin-21，IL-21）及转录因子视黄酸相关孤儿受体γt (orphan nuclearreceptor gamma t， RORγt)在吸烟导致慢性阻塞性肺疾病（ChronicObstructive Pulmonary Disease，COPD）大鼠肺组织中的表达，初步探讨他汀类药物在COPD中的作用机制。方法：1单纯被动吸烟建立吸烟大鼠动物模型：(1)将36只大鼠随机分为三组:对照组（Control）、吸烟组(Somking)及治疗组(Treatment)。除对照组外，另外两组大鼠每日在熏烟箱内给与烟雾干预，每日2次，每次吸烟30支，每次吸烟1小时，日间两次吸烟间隔4-5小时，共16周，并同时给与治疗组大鼠辛伐他汀(5mg/kg)灌胃干预，每日一次。(2)16周后，测量大鼠体重、计数支气管肺泡灌洗液（bronchveolar lavage fluid，BALF）中白细胞数量及分类，并对肺组织病理形态学进行观察。2采用免疫组化及Real-TimePCR分别对大鼠肺组织IL-17、IL-21及RORγt蛋白和mRNA的表达进行测定。结果：1实验前三组大鼠体重无明显差异（P>0.05）。吸烟结束后，Somking组大鼠及Treatment组大鼠较Control组大鼠体重下降（均P<0.01），而Somking组大鼠与Treatment组大鼠之间体重无明显变化（均P>0.05）。Somking组BALF各炎症细胞数相对于Control组明显增多（均P<0.01）。内衬间隔（pulmonary mean linear intercept, MLI）显著增加（P<0.01)，平均肺泡数（mean alveolar numbers,MAN）显著降低（P<0.01)。治疗组白细胞总数较吸烟组明显下降（P<0.01），中性粒细胞个数及巨噬细胞个数下降（P<0.01），吸烟组大鼠与治疗组大鼠相比较，平均肺泡数（meanalveolar numbers）降低（P<0.01)。内衬间隔(MLI)无明显改变（P>0.05）。2免疫组化结果显示:在肺泡间隔内，IL-17阳性细胞在Control组、Smoking组和Treatment组的表达分别为：（5.20±4.94）个／㎜2、（90.00±14.02）个／㎜2和（72.80±10.79）个／㎜2；RORγt阳性细胞在Control组、Smoking组和Treatment组的表达分别为：（6.80±5.85）个／㎜2、（77.27±7.95）个／㎜2和（65.40±5.23）个／㎜2；IL-21阳性细胞在Control组、Smoking组和Treatment组的表达分别为：（8.20±3.16）个／㎜2、（61.18±9.16）个／㎜2和（49.40±3.34）个／㎜2,三组之间各因子均存在显著性差异（P<0.01）。支气管粘膜上皮内，IL-17阳性细胞的百分比在Control组、Smoking组和Treatment组分别为：（8.60±4.84）％、（77.09±6.49）％和（68.80±10.09）％；RORγt阳性细胞的百分比在Control组、Smoking组和Treatment组分别为：（7.60±3.78）％、（79.45±6.80）％和（68.50±10.37）％；IL-21阳性细胞的百分比为：Control组（6.20±5.07）％，Smoking组（58.45±6.56）％，Treatment组（48.90±4.15）％,三组之间各因子也均存在显著性差异（P<0.01）。肺泡间隔内的IL-17阳性细胞数与平均内衬间隔（MLI）呈正相关（r=0.729，P<0.01），与平均肺泡数呈负相关（r=﹣0.889，P<0.01）。3荧光定量PCR结果显示：肺组织中IL-17mRNA的ΔCT表达水平在Control组、Somking组和Treatment组分别为(4.78±0.51)、(1.96±0.60)和(3.56±0.15)，三组之间存在明显差异（P<0.01）；RORγt mRNA的ΔCT表达水平在Control组、Somking组和Treatment组的分别为(4.69±0.82)、(2.68±0.08)和(3.89±0.21)，三组之间存在统计学差异（P<0.05）；IL-21mRNA的ΔCT表达水平在Control组、Somking组和Treatment组的分别为(5.51±0.86)、(1.99±0.61)和(3.59±0.13)；三组间存在显著性差异（P<0.01）。结论：1IL-17及其相关因子（RORγt和IL-21）在大鼠COPD形成过程中有起着重要的作用。2辛伐他汀抑制了COPD大鼠肺组织的炎症反应和肺结构的破坏。其机制可能是通过抑制大鼠肺组织中IL-17及其相关因子（RORγt和IL-21）的表达而实现的。