乳腺癌是女性最常见的癌症,在治疗过程中往往伴随着严重的毒副作用,因此寻找一种高效无毒的抗乳腺癌药物刻不容缓。课题组前期研究发现,谷糠中存在着丰富的多酚类物质,尤其是谷糠结合态多酚(Bound polyphenol of inner shell,BPIS)具有较强的抗炎、抗氧化能力和广谱的抗癌效应。但目前对于BPIS抑制乳腺癌的研究较少,其作用机制尚不明确。因此,为了阐明BPIS抑制乳腺癌的作用机制,我们将从以下方面进行探究:1.通过细胞克隆、PI染色和台盼蓝染色实验,发现经过BPIS处理后,乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231的活性被显著抑制,而正常乳腺上皮细胞MCF-10A却对BPIS不敏感,处理前后没有发生显著变化,说明BPIS能够特异性杀伤乳腺癌细胞。进一步运用网络药理学对其作用机制进行预测,结果显示自噬在BPIS特异性杀伤乳腺癌细胞的过程中发挥了重要作用。2.运用Western blot、mCherry-LC3B质粒转染和透射电镜实验,对MCF-7和MDA-MB-231细胞内的自噬水平进行检测。发现乳腺癌细胞经过BPIS处理后,自噬水平显著升高。而用自噬抑制剂三甲基腺嘌呤(3-MA)和氯喹(CQ)对乳腺癌细胞预处理后,BPIS对乳腺癌细胞的杀伤作用得到明显回调,这说明BPIS通过自噬作用杀伤乳腺癌细胞。3.通过对乳腺癌细胞内脂质含量进行检测,发现乳腺癌细胞经过BPIS处理后,发生明显的脂质积累现象。进一步运用脂质代谢组学对积累的脂质进行鉴定和分析,发现BPIS主要促进了乳腺癌细胞中鞘磷脂和甘油磷脂的积累。4.进一步对乳腺癌细胞中鞘磷脂代谢和甘油磷脂代谢的限速酶检测发现,BPIS通过诱导乳腺癌细胞PCYT1A基因的高表达,促进了乳腺癌细胞中甘油磷脂的积累和自噬的发生,进而导致乳腺癌细胞自噬性死亡。