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背景与目的：近年来，世界范围内人口的迅速老龄化，使得多发性骨髓瘤（MultipleMyeloma, MM）的发病率明显升高，位居血液肿瘤第2位，仅次于非何杰金淋巴瘤。尽管免疫调节剂与蛋白酶体抑制剂为代表的药物极大地改善了MM预后，但是几乎所有的MM患者最终出现疾病难治与复发，至今仍属不可治愈性疾病。作为核心药物的硼替佐米（Bortezomib，BTZ），已被广泛用于诱导、巩固、挽救与维持治疗等阶段。然而，BTZ的持续应用导致继发性耐药发生。近年来发现阿司匹林（Aspirin，ASA）在人结肠癌、肝癌、胰腺癌、卵巢癌等多种肿瘤中具有抗癌与肿瘤预防作用。本研究旨在通过观察ASA在体外实验与荷MM小鼠体内是否具有抗癌作用，并探讨ASA抗骨髓瘤效应的作用机制，进一步分析ASA与BTZ在MM细胞系中相互作用及分子机制，为ASA临床应用治疗MM及增强BTZ疗效提供理论与实验依据。方法：1、采用CCK-8与PI染色方法，分别检测不同浓度ASA（0、2.5、5.0、10.0mmol/L）对地塞米松敏感与耐药MM细胞系（MM1.S与RPMI-8226）的细胞增殖活性与细胞周期的影响，观察ASA对MM细胞的抗癌效应。2、采用Annexin V-FITC/PI染色法、比色法与Western blot方法，分别检测ASA对MM细胞系凋亡率、Caspase-3、-8、-9活性与PARP蛋白表达的影响，分析ASA对MM细胞的促凋亡作用。3、采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测ASA对MM细胞系Bcl-2、Bax与VEGF的mRNA与蛋白表达的影响，探讨ASA在MM细胞中的抗癌机制。4、通过建立人MM细胞移植瘤NOD/SCID小鼠动物模型，观察ASA对荷瘤小鼠生存期与移植瘤生长的影响，探讨ASA在体内的抗骨髓瘤作用。5、采用CCK-8方法与Annexin V-FITC/PI染色方法，通过检测ASA（2.5mmol/L）联合BTZ（10nmol/L）对MM1.S与RPMI-8226的细胞增殖活性与细胞凋亡的影响，分析ASA与BTZ在MM细胞中的药物相互作用。6、采用Western blot方法，检测ASA、BTZ、ASA联合BTZ分别处理MM细胞系后Akt磷酸化与Survivin蛋白水平，探讨ASA对BTZ抗骨髓瘤作用的增敏机制。结果：1、ASA对MM1.S细胞与RPMI-8226细胞均有显著的增殖抑制作用，这种作用在2.5～10mmol/L范围内呈剂量依赖性。在24～72h内，ASA对MM1.S细胞与RPMI-8226细胞的增殖抑制率呈时间依赖性。2、在2.5～10mmol/L范围内，ASA以剂量依赖性诱导MM1.S与RPMI-8226细胞凋亡。2.5～5mmol/LASA对MM1.S细胞的凋亡诱导率高于RPMI-8226细胞，但10mmol/LASA对两种细胞的凋亡诱导率相同。3、ASA处理MM1.S与RPMI-8226细胞后，G1期细胞比例均呈剂量依赖性增高，而S期细胞比率相应地降低。4、ASA处理MM1.S与RPMI-8226细胞后，Caspase-3活性均以浓度依赖性升高，同时伴随Caspase-8与Caspase-9活性的明显升高。5、在2.5~10mmol/L范围内，ASA促进MM1.S与RPMI-8226细胞的PARP蛋白（116KD）裂解，且呈剂量依赖性。6、在MM1.S细胞与RPMI-8226细胞中，ASA以浓度依赖性下调Bcl-2与VEGF mRNA与蛋白表达，而Bax mRNA与蛋白则呈浓度依赖性上调。7、通过对NOD/SCID小鼠分别皮下接种MM1.S与RPMI-8226细胞（1×107个/只），成功地建立了荷骨髓瘤移植瘤小鼠动物模型，瑞氏染色与H-E染色显示为典型的骨髓瘤细胞，总成瘤率为71.88%（23/32）。8、与PBS对照组相比，ASA处理明显抑制了荷MM细胞系（MM1.S细胞与RPMI-8226细胞）移植瘤小鼠的肿瘤生长。9、与PBS对照组相比，ASA处理显著延长了荷MM细胞系（MM1.S细胞与RPMI-8226细胞）移植瘤小鼠的中位生存期（37.5d vs21d，p=0.035；35.5dvs21d，p=0.035）。10、ASA与BTZ联合组以时间依赖性抑制MM1.S与RPMI-8226细胞的增殖活性，且明显高于ASA或BTZ单药组。进一步分析ASA与BTZ的相互作用，发现二者在抑制MM细胞增殖中呈相加作用。11、在MM1.S与RPMI-8226细胞中，ASA与BTZ联合组的细胞凋亡率均明显高于ASA单药组及BTZ单药组。12、ASA单药可抑制MM细胞Akt-Thr308磷酸化；而BTZ单药诱导MM细胞Akt-Thr308磷酸化。但ASA与BTZ联合组则几乎完全抑制MM细胞Akt-Thr308磷酸化。13、ASA单药与BTZ单药抑制MM细胞的Akt-Ser473磷酸化。然而，与ASA或BTZ单药相比，ASA与BTZ联合组显著抑制Akt-Ser473磷酸化。14、ASA单药下调MM细胞Survivin蛋白水平；而BTZ单药则上调MM细胞Survivin表达。ASA与BTZ联合组较ASA单药更显著抑制MM细胞Survivin蛋白水平。结论：1、ASA在体内外均具有抑制MM细胞增殖的作用。2、ASA通过线粒体与死亡受体两条途径诱导MM细胞凋亡。3、ASA的抗MM作用不依赖于地塞米松的敏感性。4、ASA诱导骨髓瘤细胞周期阻滞于G1期。5、ASA通过下调MM细胞Bcl-2与VEGF及上调Bax表达而起抗癌作用。6、ASA对硼替佐米的抗骨髓瘤效应具有增强作用。7、ASA通过抑制硼替佐米诱导的Akt磷酸化发挥化疗增敏作用。8、ASA通过下调Survivin蛋白发挥对硼替佐米的抗骨髓瘤作用。