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目的:为了解甲状腺癌组织中p16和RASSF1A基因的甲基化情况,本研究采用MSP方法,对31例甲状腺癌组织进行了甲基化检测,与9例正常甲状腺组织的甲基化情况进行对比分析,并与患者的病理临床资料相联系,探讨p16和RASSF1A基因甲基化与甲状腺癌发生发展的关系。 方法:采用上海生物工程有限公司临床样品DNA提取试剂盒提取基因组DNA,并采用美国Chemicon公司CpGenomeTM DNA修饰试剂盒对组织DNA进行亚硫酸氢盐修饰,采用甲基化特异性PCR法(methylation-specific PCR,MSP)进行p16和RAFF1A基因启动子区甲基化水平的检测。实验结果采用SPSS10.0统计软件进行处理,各组间率的比较采用Fisher’s精确概率法,检验显著性水准取α=0.05,P<0.05有显著性意义。 结果:1.25例乳头状癌中p16基因甲基化阳性率在为36.0%(9/25),RASSF1A基因为52.0%(13/25);6例滤泡状腺癌中p16基因甲基化阳性率为50.0%(3/6),RASSF1A基因为83.3%(5/6)。9例正常甲状腺组织中未检测到p16和RASSF1A基因的甲基化。P16和RASSF1A基因甲基化阳性率在癌组织明显高于正常甲状腺组织,差异有统计学意义,P<0.05;两种不同的癌组织类型(PTC和FTC)中p16基因和RASSF1A基因的甲基化阳性率差异无显著性;两种不同基因(p16和RASSF1A)之间的甲基化阳性率差异亦无统计学意义。2.p16和RASSF1A基因甲基化在患者年龄、性别、病理组织学类型之间差异无统计学意义。3.在12例有浸润转移患者中8例检测到p16基因甲基化(66.7%),19例无浸润转移患者中检测到p16基因甲基化为4例(21.1%)。两组间差异有统计学意义(P<0.05)。4.在12例有浸润转移患者中10例检测到RASSF1A基因甲基化(88.3%),19例无浸润转移患者中检测到RASSF1A基因甲基化为8例(42.1%)。两组间差异有统计学意义(P<0.05)。