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目的:由于肿瘤细胞增殖过快普遍存在缺氧,而缺氧诱导的表观遗传改变可能是肿瘤细胞适应缺氧微环境的关键,是目前研究白血病重要发病机制之一。通过建立体外缺氧模型,研究缺氧对急性髓系白血病KG-1细胞增殖代谢影响、HIF-1α表达变化以及对基因组甲基化的影响,将肿瘤细胞缺氧代谢与表观遗传学联系起来,为急性白血病等血液系统恶性肿瘤的诊治研究提供了新的思路与实验依据。方法:1.以不同氧浓度（21%、3%、1%）处理急性髓系白血病细胞系KG-1细胞24、48、72小时,以常氧为对照组。用CCK-8法检测细胞活性,LDH试剂盒测定细胞培养基中LDH,以了解缺氧对KG-1细胞增殖代谢的影响。2.采用荧光实时定量PCR方法来检测HIF-1αmRNA表达,Western blot方法检测HIF-1α蛋白表达以了解缺氧对KG-1细胞中HIF-1α表达的影响。3.采用5-羟甲基化胞嘧啶（5-hmC）及5-甲基化胞嘧啶（5-mC）检测试剂盒检测5-hmC及5-mC含量,以了解缺氧及HIF-1α对KG-1细胞基因甲基化的影响。4.通过慢病毒感染HIF-1α真核表达质粒,使细胞过表达HIF-1α。实验分为慢病毒载体GV358+常氧对照组、过表达GV358-HIF-1α+常氧组、慢病毒载体GV358+缺氧组、过表达GV358-HIF-1α+缺氧组共四组。采用荧光实时定量PCR、Western-blot方法检测HIF-1αmRNA及蛋白的表达水平。采用抗原抗体免疫检测细胞基因组DNA的甲基化态势（5-hmC及5-mC含量）、甲基化特异性PCR（MSP）检测细胞中P15基因启动子区甲基化。以了解HIF-1α过表达对KG-1细胞基因组甲基化及P15基因甲基化的影响。5.采用YC-1抑制HIF-1α的表达。实验分为DMSO+常氧对照组、YC-1+常氧组、DMSO+缺氧组、YC-1+缺氧组共四组。采用荧光实时定量PCR、Western-blot方法检测HIF-1αmRNA及蛋白表达水平。采用抗原抗体免疫检测细胞基因组DNA的甲基化态势（5-hmC及5-mC含量）、MSP检测细胞中P15基因启动子区甲基化,以了解HIF-1α抑制对KG-1细胞基因组甲基化及P15基因甲基化的影响。结果:1.缺氧促进了KG-1细胞增殖及代谢,且随着缺氧程度增加及时间的延长,其增殖活性及代谢逐渐增强（P<0.05）。2.缺氧促进KG-1细胞中HIF-1αmRNA及蛋白的表达,其中1%O248h组表达最高（P<0.05）。3.缺氧组KG-1细胞5-hm C含量均高于常氧组,而5-mC含量均低于常氧组（P<0.05）。4.HIF-1α过表达后结果显示:与正常对照组相比,HIF-1α过表达组HIF-1αmRNA及蛋白表达水平增强、5-hmC含量增加,5-mC含量减少（P<0.05）;HIF-1α过表达+缺氧组细胞HIF-1α表达水平、5-hmC含量较正常对照组明显增强（P<0.05）;与正常细胞缺氧组相比,HIF-1α过表达+缺氧组KG-1细胞HIF-1αmRNA及蛋白表达、5-hmC含量亦增高,5-mC含量亦减少（P<0.05）。常氧情况下,KG-1细胞表现出P15基因启动子区部分甲基化,缺氧处理或/和HIF-1α过表达后P15基因启动子区呈现去甲基化。5.HIF-1α抑制后结果显示:与DMSO+常氧对照组相比,YC-1组KG-1细胞HIF-1αmRNA及蛋白表达水平减少,5-hmC含量减少,而5-mC含量增多（P<0.05）;与正常细胞缺氧组相比,YC-1+缺氧组KG-1细胞HIF-1αmRNA及蛋白表达减少,5-hmC含量减少,5-mC含量增多（P<0.05）;YC-1抑制HIF-1α表达后,P15基因启动子区甲基化增强。结论:1.缺氧可促进KG-1细胞的增殖、代谢,缺氧越严重及缺氧时间越长,KG-1细胞增殖活性及代谢越强。2.缺氧促进KG-1细胞中HIF-1αmRNA及蛋白的表达。3.缺氧或HIF-1α过表达可促进KG-1细胞基因组及P15基因去甲基化,HIF-1α表达抑制可使KG-1细胞基因组及P15基因甲基化增强。