论文部分内容阅读
作为一个潜在的乳腺致癌物，双酚A(BPA)普遍存在于环境中和人体内。越来越多的证据表明BPA暴露可能跟人类疾病，例如乳腺癌的发生，存在某种联系。先前以啮齿类和非人类的灵长类动物的研究证据表明，低剂量BPA暴露能够改变乳腺的正常发展，如导致上皮细胞密度增加，产生癌前和癌病变，这些变化在成年的乳腺中会进一步显现出来。这些异常变化的具体机制和本质仍然是未知的，需要进一步的研究。最新的研究发现乳腺干细胞对乳腺癌的发生和发展十分敏感。 目的： 本课题用新证据讨论双酚A诱导乳腺肿瘤细胞异质性的最敏感窗口和致瘤性转化过程BPA最可能作用和诱发癌前变化的靶细胞。 方法： 年龄2.5月的FVB GFP小鼠从看到阴道栓的第九天用渗透泵连续暴露BPA28天，BPA溶解于50％的二甲基亚砜中，剂量分别为0，25，250 ng/kg/day。母鼠怀孕21天产下小鼠后，控制鼠崽个数在8-10个。21天后，小鼠分笼，将每个处理组得到的小鼠随机分别各自分成三组（对照组，0BPA组，250BPA组）。用于青春期研究的小鼠全部来自于对照组，3周龄小鼠分笼后开始灌胃暴露BPA，连续28天，BPA溶解于芝麻油中，剂量分别是0，25，250μg/kg/day。用于围产期和终生期的三个处理组的小鼠各自分别来自于对照组，25BPA组和250BPA组。终生期小鼠结束灌胃后，通过饮水连续暴露BPA，BPA溶解于50％的二甲基亚砜加到小鼠饮用水中，三组小鼠的BPA暴露的最终剂量0，25，250μg/kg/day，与母鼠0，25，250ng/kg/day剂量相对应。原生乳腺收集时间，怀孕期在鼠崽分笼后一个月，剩余时期在小鼠年龄七个月。组织收集后进行乳腺干细胞的定性和定量分析，乳腺的形态分析，病理学特征分析。体外培养得到的实体3D结构和空心3D结构进一步做小鼠体内移植再生分析。 结果： 本研究结果显示经荧光激活细胞分选出的四个细胞群对BPA的暴露易感性存在不同，高剂量BPA似乎引起异常变化，如3D结构直径增加，再生乳腺出现淋巴瘤和恶性癌前病变。此外，我们的结果显示实体3D荧光高表达细胞群可能作为癌前起始源细胞群进而反应在其在干细胞等级的起源中。最后，青春期是唯一可以导致乳腺干细胞基底细胞群、管腔细胞群和间质细胞群之间稳态失衡的最敏感窗口。 结论： 使用体外干细胞定性和定量分析，我们发现乳腺干细胞(MaSCs)是研究双酚A诱发乳腺早期肿瘤转化的目标易感靶点。我们的研究首次为敏感窗口双酚A导致乳腺肿瘤细胞的异质性提供一个新的视野。这些问题的阐明将对乳腺癌疾病的诊断，预后和治疗提供重要帮助。