鲁米诺荧光纳米材料的合成及其对生物分子的检测

来源 :重庆师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lhchg1982
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基于聚集诱导发光原理的荧光纳米材料具有光学性质稳定、量子产率高等特点,迄今为止,已经在细胞成像、环境检测、化学传感、生物传感、食品检测、疾病诊断等方面有了广泛的应用。本文主要研究了鲁米诺荧光纳米材料(luminol-Tb荧光纳米材料、luminol-Al荧光纳米材料)的合成以及其对尿酸、碱性磷酸酶和谷胱甘肽的检测,具体内容包括以下三个方面:1.利用鲁米诺(luminol)与铽离子(Tb3+)之间的配位作用,合成了luminol-Tb荧光纳米材料。该luminol-Tb荧光纳米材料的荧光强度比鲁米诺增强近40倍,其最大激发波长在290 nm,最大发射波长在430 nm。尿酸可以与该luminol-Tb荧光纳米材料发生光诱导电子转移,导致其荧光猝灭。因此,建立了一种检测尿酸的高灵敏荧光猝灭分析法,其检测范围为0.1-50μM,检出限为28n M。与一些常见的金属离子、葡萄糖、抗坏血酸、多巴胺、肌酐、尿素和半胱氨酸相比,luminol-Tb荧光纳米材料的荧光信号受尿酸的影响较大,表明该方法检测尿酸具有高选择性。此外,采用加标回收率法考察该方法的准确度与检测实际血清样品中尿酸的可行性,向不含尿酸的血清样品中分别加入5μM、10μM和30μM尿酸,其加标回收率为97.50%-101.30%,表明该方法采用luminol-Tb荧光纳米材料检测尿酸,其准确度较高,并且有望运用于实际血清样本中的尿酸的检测。2.利用鲁米诺与铝离子之间的配位作用,合成了luminol-Al荧光纳米材料,且该荧光纳米材料的荧光强度比鲁米诺增强近8倍。可利用该荧光纳米材料检测焦磷酸根与碱性磷酸酶的含量,其原理为:焦磷酸根(PPi)与铝离子的配位能力比鲁米诺与铝离子的强,可以阻止铝离子与鲁米诺的聚集诱导发光,使luminol-Al荧光纳米材料的荧光强度降低。基于此,建立了一种检测焦磷酸根的高灵敏荧光猝灭分析法,其检测范围为0.1-60μM,检出限为21.4 n M。当PPi被碱性磷酸酶(ALP)水解成磷酸盐(Pi)后,铝离子与Pi的配位能力弱于其与PPi的配位能力,导致luminol-Al荧光纳米材料的荧光强度恢复。因此,建立了一种检测碱性磷酸酶的高灵敏荧光增强分析法,其检测范围为0.5-20 U/L。采用加标回收率法考察该方法的准确度以及检测实际血清样品中碱性磷酸酶的可行性,其加标回收率在97.20%-101.20%之间,表明luminol-Al荧光纳米材料检测碱性磷酸酶准确度高,并且有望运用于实际血清样本中的碱性磷酸酶的检测。对比于其它检测法,该检测PPi和ALP的荧光方法具有灵敏度高、选择性高、操作简便等优点,在生物分析和疾病的早期诊断的领域中具有潜在的应用价值。3.利用谷胱甘肽(GSH)将二氧化锰纳米片还原为二价锰离子,阻止luminol-Al荧光纳米材料与二氧化锰纳米片之间的荧光共振能量转移,从而使luminol-Al荧光纳米材料被二氧化锰纳米片猝灭的的荧光强度恢复。基于此原理,建立了一种检测谷胱甘肽的高灵敏荧光增强分析法。该方法检测GSH的范围为0.2-20μM,检测限为45 n M,对比于其它方法,该方法具有高灵敏度。与GSH相比,其它离子和生物分子(L-赖氨酸、L-苏氨酸、L-缬氨酸)对luminol-Al荧光纳米材料的荧光信号影响很小,表明该方法用于检测GSH具有高选择性。采用加标回收率法考察该方法检测谷胱甘肽的准确度以及运用于实际血清样品中谷胱甘肽检测的可行性,其加标回收率为97.90%-101.69%,这表明该方法检测GSH具有高准确度并有望运用于实际样品中谷胱甘肽的检测。
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