绿玉树是大戟科大戟属植物，又名橡胶大戟(rubber euphorbia)、绿珊瑚、铅笔树、白乳木(millkbush)等。是非洲和亚洲一些国家的民间良药，非洲干旱地区重要的能源农业植物，同时，绿玉树具有极高的观赏价值，是美化公园、庭园的景观植物，是集水土保持、供能、药用、观赏、工业原料、环境绿化于一体，具生态、能源、经济综合效益的多功能树种。国外对其药用价值和作为新能源原料非常重视，在活性成分的分离、鉴定、环境因子对活性成分合成、积累的影响，细胞悬浮培养以及有效成分的开发利用上开展了大量的研究工作。国内自70年代初在海南、云南等地把该树种作为观赏植物进行引种栽培，其药用和能源价值并没引起重视，研究报道很少。2000年申报的“能源树种绿玉树的引种栽培及其利用”课题被国家林业局列为“国外先进农业技术引进项目”(即“948”项目)。该文是项目研究的核心。本研究以美国、海南、云南不同种源引进的绿玉树枝条为材料，建立了扦插和离体快速繁殖体系，在此基础上开展了物理、化学抗寒诱变和多倍诱导等研究。围绕抗寒诱变和新种质的获得，对经不同途径获得的诱变材料进行了乳汁主要化学成分分析、染色体组RAPD分析、电解质的相对外渗率、线粒体和叶绿体超微结构的变化等基础性研究。这是首次在国内对绿玉树进行的系统研究，具有重要的理论和实践意义，获得了有价值的研究成果。 1、优化了绿玉树扦插繁殖技术，成功建立了绿玉树微型快繁系统：研究插条种源、插条生理成熟度、激素种类和浓度、扦插基质、扦插季节对生根的影响；探讨激素种类、浓度及其它非激素类物质对诱导不同外植体分化、试管苗生根、移栽的影响，筛选出了适宜培养基、培养条件和培养途径。 (1) 绿玉树属于扦插易生根树种，插条在所试验的六种扦插基质上均可生根，且春、夏、秋季均可进行嫩枝扦插，但生根率和生根质量受插条生理状况、扦插基质、外源激素等条件的影响； (2) 不同种源插条生根起始时间不同，达到生根高峰持续的时间不同，但达到生根高峰后的生根率没有显著差异。美国种源生根最慢，持续时间长(90d后生根率达93.3％)，云南、海南种源在生根率的变化上非常相近。 (3) 低浓度生长素NAA、IBA、ABT及腐殖土对插条生根具有显著的促进作用，其 — ————— 中以半木质化插条经ABT处理lh扦插在肥力条件、透气性、保水较好的“河沙1＋ 珍珠岩工＋腐殖土1”三合一基质上生根率高（90％以上），根多（平均5根／插条）、 根粗短。 O）叶、茎段在附加任何一种植物激素mA、2，4刁，ZT，KT等）的MS培养基 上均能诱导出淡绿色致密的工型和淡黄色疏松的11型愈伤组织，但均为非胚性愈伤组 织，但愈伤组织通过器官发生途径再生小苗困难。 （5）本试验所建立的再生体系为腋芽增殖。即以嫩枝诱导侧芽萌生，取新长出的 嫩枝芽做继代培养，经过起始培养、增殖培养和生根培养获得丛生小苗，以分割丛生 苗来扩大繁殖。诱导腋芽、顶芽萌发的适宜培养基为3／4MS＋ZTO．sing／1＋NAAO．01mg／1 或／和1／ZMS＋BAO．5＋NAAO．01，诱导率达80％以上。丛芽增殖培养基为： 3／4MS＋ZTO．5－Zing／L＋NAAO．02＋GA。0．cling／1，芽的增殖系数为4．5左右，有效苗率＞80％； 生根培养基为1／ZMS＋0．sing／NAA（或工BA）。 （6）建立了绿玉树微型快繁程序。 ＊）外植体经21．1％的PEG预处理后可减少外植体褐化率，提高腋芽、顶芽的萌一 发率；多效哇能缩短试管苗的节间，使其健壮，同时能抑制切口处产生愈伤组织，延 缓生根时间、抑制根生长，且在试验浓度范围内＊——sing／1）随浓度的增加，抑 制作用加强。在本试验中AgN03能抑制愈伤组织的分化和生长，但同时也抑制芽的分 化。 2．率先探讨抗寒驯化途径：对绿玉树组培苗进行了物理化学诱变及 染色体加倍的研究，获得了绿玉树四倍体新种质：探讨了PP3％与CaCI。对提 高绿玉树扦插苗抗寒性的影响。对绿玉树试管小苗进行不同剂量的Co”－r辐射诱变、 EMS化学诱变，秋水仙碱诱导多倍体研究，筛选出HYP不敏感植株和多倍体植株，探。讨不同物理化学诱变剂对绿玉树诱变的影响。 （1）多效哇能显著降低新梢长度的生长，增加分枝数，抑制低温处理时膜透性 的增加，提高绿玉树对零上低温的抵抗能力。0．2％PP333能提高叶绿素含量，但低浓 度的 PP333①．1刀 们却降低了叶绿素的含量。C3CI。，对绿玉树扦插苗的形态影 响不明显，0．05％一0．l％的CaClz能抑制低温下细胞膜透性的增加，提高叶绿素含量。