颈髓前后路稳定压迫及不同减压时间与脊髓功能改变关系的实验研究

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研究背景:脊髓型颈椎病(Cervical Spondylotic Myelopath,CSM)是颈椎退变性疾病的一种类型,以椎间盘退变为病理基础,包括相邻椎节椎体后缘骨赘的形成,造成脊髓神经细胞和供应脊髓血液的血管直接受到压迫,出现一系列的脊髓病变,从而出现不同程度的脊髓功能障碍的一种疾病。随着社会老龄化的加快,本病已经成为严重威胁老年人健康的最常见的颈椎疾病之一。目前,对于颈椎椎间盘退变、椎间高度丧失、骨赘形成以及黄韧带退变等病理特点已经有较为深刻的认识,但是对于脊髓长期受压后所发生的一些病理改变还存在不同的认识,其中主要的原因是没有固定而合理的动物实验模型。世界各国目前仍然在摸索一些新的动物实验方法,希望能够通过动物实验模型对脊髓长期受压后的各种变化从分子水平进行认识。作者在广泛阅读国内外脊髓压迫文献后,希望通过山羊颈椎脊髓前后路同时压迫模型,对脊髓受压后发生的病理变化、电生理传导、以及脊髓神经细胞凋亡等方面作一些研究。 研究目的:首先建立颈椎脊髓长期稳定受压的动物实验模型,证明该模型引起的山羊颈椎脊髓受压后与颈椎病患者发生相似的病理改变,这是本研究课题的基础;其次,通过上述模型研究脊髓受压后传导功能变化的情况,说明脊髓受压后发生功能变化的电生理原因;第三,通过上述模型,证明山羊脊髓受到长期稳定的压迫后神经细胞内发生一系列的改变,这些变化直接影响脊髓功能状况;第四,通过观察不同压迫时间和不同减压时间对脊髓病理生理、电生理、细胞凋亡等方面的影响,说明手术减压对于改善受压脊髓功能的重要性和必要性。 研究内容:第一部分 山羊颈椎脊髓前后稳定持续压迫模型的建立及其病理改变:许多所谓的脊髓慢性压迫实际上是一种渐进性压迫,准确的说只是一种亚急性脊髓损害。由于每一种慢性脊髓压迫实验模型都存在其设计上的不足,因此,对于由此产生的实验结果目前仍然存在较大的争论。作者试图建立一种颈椎脊髓持续稳定压迫模型,通过这新的动物实验模型对颈椎脊髓压迫的病理改变过第二军医大学中文摘要博士学位论文程做进一步的探讨。 第二部分山羊颈椎脊髓稳定持续性压迫和减压后不同时间脊髓传导功能改变的实验研究:脊髓是一个上传下达躯体反射的初级中枢,因而对躯体上传的感觉信息有重要的整合作用并传向上位高级神经中枢;同时对上位中枢加工的信息亦可通过椎体系和椎体外系经脊髓下传到各级效应器。对这种传导功能的有效实用的检测手段是诱发电位(evoked potentials,EP)的检查。各种不同模型的脊髓损伤的研究飞诱发电位的检查是对其功能评估的有效工具。为了详细了解羊颈椎脊髓前后稳定持续压迫后发生传导功能的变化,作者采用计算机平均迭加技术进行诱发电位的检查,以观察不同压迫时间与不同手术减压时间对于脊髓传导功能的影响,探讨手术减压对其传导功能影响相应的机制与意义。 第三部分颈髓前后路稳定持续压迫不同时间以及不同减压时间对脊髓不同区域细胞凋亡影响的研实验究:临床上见到许多颈椎病人在颈椎骨赘切除、椎间融合固定或颈椎后路减压手术后,通过影象学检查发现脊髓受压部位的压迫得到了完全解除,但患者症状仍然不能完全缓解,这说明脊髓在受到长期压迫后即使完全减压仍然存在一些破坏性的病理损害。对于这些病理变化,目前没有一种很好的方法进行评估,尽管许多实验己经证明,在脊髓受压后白质和灰质中存在不同程度的细胞凋亡,细胞凋亡的不同程度与脊髓功能的恢复程度有着直接的关系。但由于实验模型的关系,造成脊髓的压迫一般是急性或亚急性的,没有稳定持续压迫引起凋亡的报道。作者希望通过一种新的动物模型,观察脊髓稳定持续压迫后不同时间以及不同减压时间脊髓不同区域细胞凋亡的情况,探讨细胞凋亡与脊髓损害程度的关系。 研究方法:20只山羊分为三大组:对照组(n=4只)、压迫3个月组(n=8只)、压迫6个月组(n=8只),压迫3个月和6个月组分别分为减压1个月(n=4只)和减压3个月(n=4只)组。所有动物在实验前进行肢体运动功能评分(按照改良的Tarlov分级)。模型的制备:采用先后两次手术,间隔2周,在C臂透视机直接透视和电生理监测仪监测下分别在山羊颈椎脊髓前后方置入钦合金螺钉和钢板。预实验己经发现,在脊髓前后方置入螺钉和钢板后3个月实验动物的运动功能开始出现明显的改变,因此压迫3个月作为一个时间观察点,在次基础之上再继续压迫3个月,达到6个月也作为1个观察点,以说明不同压迫程度引第二军医大学中文摘要博士学位论文起脊髓功能改变的情况。为了明确不同减压时间对于脊髓功能运动改变的影响,在脊髓压迫3个月和6个月时分别进行减压手术,手术后1个月和3个月时观察运动功能情况,将减压后的各项观察指标与压迫后没有减压时进行比较,同时与正常组比较。 观察指标: 影像学观察:X光机、CT、MRI检查; 病理改变:标本的大体观察、不同染色(HE染色、尼氏染色和Homles染色)时光镜检查和电镜检查; 电生理监测仪:记录不同时相点实验动物SEP和MEP的改变; 凋亡细胞检测:?
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