己酮可可碱对内毒素诱导的急性肺损伤肺微血管通透性的保护及其机制的研究

来源 :华中科技大学同济医学院 华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cairinga
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目的:研究己酮可可碱对内毒素诱导的急性肺损伤肺微血管通透性的保护及其机制.方法:实验分为两部分(1)在体部分:静脉注射内毒素(LPS)复制大鼠急性肺损伤模型,观察动脉血氧分压、支气管肺泡灌洗液(BALF)检查、肺微血管通透性指数(PMPI)及肺组织学检查等指标的变化,了解己酮可可碱(PTX)对内毒素诱导的大鼠急性肺损伤肺微血管通透性的影响.(2)离体部分:以人脐静脉内皮细胞为培养对象,复制内毒素诱导的内皮细胞单层损伤模型,并以内皮单层滤过系数(Kf)和蛋白质渗透压反射系数(osmotic reflection coefficient,σ)为检测指标,了解己酮可可碱对内皮细胞单层通透性的影响;以Western印迹杂交技术检测人脐静脉内皮细胞p38丝裂原激活蛋白激酶(Mitogenactivated protein kinase,MAPK)活性,观察PTX对p38 MAPK的活性影响;以考马斯蓝双抽提染色法、肌动蛋白(Actin)免疫组织化学技术、F-Actin荧光染色法,观察PTX对内皮细胞骨架、Actin含量及F-Actin含量变化的影响.结论:(1)PTX可直接或间接保护内毒素诱导的急性肺损伤肺微血管通透性.(2)PTX直接保护微血管通透性的作用与其对肺微血管内皮细胞的直接保护作用有关,这种直接作用是通过拮抗内毒素诱导的内皮细胞p38丝裂原激活蛋白激酶活性从而稳定内皮细胞骨架来实现的.
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